توليد ثقافة الخلايا العصبية الأولية منخفضة الكثافة من الخلايا العصبية الجنينية المجمدة

ابدأ بخلايا عصبية جنينية محفوظة بالتبريد تحتوي على التبريد وضعها في كتلة تسخين للذوبان المتحكم فيه.

بعد ذلك ، انقل الخلايا العصبية المذابة إلى أنبوب وقم بتخفيفها بوسط عصبي قاعدي متنقلا لموازنة الضغط الاسموزي ومنع تحلل الخلايا.

هذا يولد تعليقا متجانسا مع خلايا عصبية مشتتة بشكل موحد.

قم بزرع المعلق العصبي المخفف على صفيحة متعددة الآبار مطلية ب poly-L-lysine تحتوي على وسط عصبي أساسي غني بالعناصر الغذائية والمضادات الحيوية.

احتضان للسماح بولي-L-يسين مشحونة إيجابيا للتفاعل مع الخلايا العصبية عن طريق التفاعلات الكهروستاتيكية, تسهيل الالتزام.

تزويد الآبار بالوسائط العصبية القاعدية الجديدة.

احتضان الخلايا في نفس الوسط في ظروف رطبة لمنع تبخر الوسائط.

تستخدم الخلايا العصبية الجنينية العناصر الغذائية وتنمو عن طريق تطوير العمليات العصبية وتشكيل الخلايا العصبية الأولية.

يحافظ الوسط العصبي القاعدي على الخلايا العصبية الأولية التي تبدو متباعدة على نطاق واسع ، مما يولد ثقافة أولية منخفضة الكثافة مع وصلات عصبية.

ابدأ بطلاء صفيحة دقيقة مكونة من 96 بئرا ب 100 ميكرولتر من بولي إل ليسين لكل بئر. بعد ذلك ، احتضن الألواح طوال الليل عند 37 درجة مئوية. في نهاية الحضانة ، قم بإزالة محلول بولي إل ليسين. اغسل الأطباق مرتين بالماء المعقم ومرة واحدة باستخدام وسط استزراع طازج خال من المكملات الغذائية. ضع الأطباق