تقنية بسيطة لعزل وزراعة الخلايا النجمية الفئرانية

قطع قشرة الفأر إلى قطع صغيرة ونقلها إلى وسط تشريح بارد يحتوي على محلول ملح مخزز.

أضف الإنزيمات الهاضمة لفصل المصفوفة خارج الخلية.

لإزالة الإنزيمات المتبقية ، اغسلها بوسط التشريح البارد.

استبدل هذه الوسيلة بوسط تخصيب الخلايا النجمية.

بعد ذلك ، استخدم ماصة لفصل قطع الأنسجة.

مرر المعلق عبر مصفاة لإزالة الأنسجة غير المنفصلة والحصول على خلايا مفردة.

انقل الخلايا إلى صفيحة مطلية بالبوليمر موجبة الشحنة. احتضان مع الرج.

تلتصق الخلايا النجمية بقوة ، بينما تنفصل الخلايا العصبية غير المرتبطة بشكل فضفاض ، والخلايا الدبقية الصغيرة ، والخلايا الدبقية قليلة التغصن.

يحول وسط التخصيب الخلايا النجمية الناضجة إلى خلايا نجمية متعددة الأضلاع مقسمة

قم بإزالة الخلايا المنفصلة واغسل الخلايا النجمية بمخزن مؤقت للفوسفات.

أضف الإنزيمات الهاضمة لفصل الخلايا النجمية.

أضف وسيطا يحتوي على مصل لإيقاف النشاط الأنزيمي. اجمع الخلايا النجمية في أنبوب وجهاز طرد مركزي.

تخلص من المادة الطافية. أعد تعليق الخلايا في وسط نضج الخلايا النجمية لتعزيز بنية الخلايا النجمية الناضجة النموذجية على شكل نجمة.

قطع أي نسيج قشري لاستخدامه لتوليد الخلايا النجمية إلى قطع لا يزيد حجمها عن 1 ملليمتر مكعب. بمجرد جمع جميع قطع المناديل ، انتظر حتى تستقر في قاع الأنبوب. ثم استنشق أكبر قدر ممكن من المتوسط. بعد ذلك ، أضف 2 إلى 3 ملليلتر من 0.05٪