موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:32 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بأحادي الفوسفات الأدينوسين الدوري ، أو cAMP ، وهو جزيء إشارات ينظم الوظائف الخلوية المختلفة. إضافة cAMP إلى ثقافة مشتركة للخلايا العصبية والبلاعم.
تؤدي جزيئات المخيم من الوسط وعوامل النمو من الخلايا العصبية إلى تنشيط البلاعم.
انقل الملحق مع البلاعم المنشطة إلى بئر آخر يحتوي على وسط ثقافة البلاعم.
هنا ، تطلق البلاعم السيتوكينات والكيموكينات في الوسط ، وتشكل وسطا مشروطا أو CM.
الطرد المركزي CM لتكوير المكونات الخلوية.
انقل المادة الطافية والفلتر لإزالة الحطام الخلوي.
أضف CM الذي تم جمعه إلى ثقافة الخلايا العصبية. تعمل السيتوكينات والكيموكينات في CM المجمعة على تعزيز امتدادات الخلايا العصبية.
أضف بارافورمالدهيد المبرد لإصلاح الخلايا.
أضف حاجزا حاجب لتجنب الارتباط غير المحدد للأجسام المضادة. اغسل لإزالة المخزن المؤقت المتبقي.
تطبيق الأجسام المضادة الأولية التي تستهدف بروتينات الهيكل الخلوي للخلايا العصبية. يغسل لإزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة.
أضف الأجسام المضادة الثانوية المترافقة بالفلوروفور الأحمر التي ترتبط بالأجسام المضادة الأولية. يغسل لإزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة.
باستخدام الفحص المجهري الفلوري ، تصور الخلايا العصبية ذات اللون الأحمر مع الامتدادات.
بعد أربع ساعات من الزراعة المشتركة للبلاعم العصبية ، أضف 2 ميكرولتر من محلول 100 ميكرومولار ديسيبل-cAMP إلى الثقافات
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية