موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 2:35 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بجزء من الأذن الداخلية للفأر الذي يحتوي على العقدة الحلزونية وعضو كورتي ، وهي هياكل متخصصة في الأذن الداخلية.
يحتوي عضو كورتي على خلايا شعرية تعمل كمستقبلات للإشارات السمعية.
تتكون العقدة الحلزونية من أجسام الخلايا العصبية التي توسع العمليات لتعصيب خلايا الشعر في عضو كورتي.
افصل العقدة الحلزونية عن عضو كورتي واحصل على أقسام صغيرة من الأنسجة أو مستخلصات منه.
الآن ، خذ مصفوفة متعددة الأقطاب الكهربائية المطلية بمصفوفة خارج الخلية تحتوي على وسائط ثقافة.
ضع المكثفات على المصفوفة وضع عضو كورتي خارج منطقة القطب. حضن.
تعلق المزاعم على سطح الأقطاب الكهربائية المتعددة المطلي.
أضف بانتظام وسائط تحتوي على بروتينات المصل وعوامل النمو.
أثناء الاستزراع ، توفر مكونات الوسائط وعضو كورتي دعما عصبيا ، مما يعزز نمو الخلايا العصبية من الخلايا العصبية العقدية الحلزونية فوق الأقطاب المتعددة.
افصل عضو كورتي عن العقدة الحلزونية في modiolus عن طريق إمساك الجزء القاعدي من العقدة الحلزونية وعضو كورتي بالملقط ، وفك عضو كورتي ببطء من القاعدة إلى القمة. بعد ذلك ، قم بقص الاستنتاجات الجانبية من العقدة الحلزونية باستخدام ملقط أو مقص أو سكاكين للتشريح المجهري.
الآن ، انقل التصادعات العقدية الحلزونية وعضو كورتي إلى الشرق الأوسط وأفريقيا. بعد ذلك ، ضع مستخلصات SG فوق منطقة القطب الكهربائي وعضو كورتي ، على بعد حوالي 5 ملليمترات من منطقة القطب. ضع النباتات الخارجية وعضو كورتي على المجالات المتعددة الأطراف مع تجنب تلف الأنسجة. بعد ذلك ، ضع المتوسطات البيئية بعناية في الحاضنة والثقافة عند 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيدالكربون
.في اليوم التالي ، افحص النباتات الخارجية بصريا للتأكد من ارتباطها بالاتفاقات البيئية المتعددة الأطراف. ثم أضف 100 ميكرولتر من وسط الاستزراع الذي يحتوي على 10٪ FBS و BDNF يوميا لمدة خمسة أيام متتالية. في اليوم 6 ، أضف 2 مل من وسط الاستزراع ، يحتوي على 10٪ FBS و 5 نانوغرام لكل مليلتر BDNF ، وقم بزراعة الأنسجة لمدة 13 يوما إضافية.