توليد الخلايا العصبية من الخلايا الجذعية متعددة القدرات المشتقة من الدم

خذ صفيحة دقيقة مع أغطية زجاجية موضوعة في قاع الآبار.

أدخل بوليمر موجب الشحنة لتغطية الغطاء وغسله لإزالة أي بوليمر غير مرتبط. عالج ببروتين مصفوفة خارج الخلية لتغطية الغطاء وشفط البروتينات غير المرتبطة.

يعمل الطلاء كركيزة ثقافة تسهل التصاق الخلايا.

أضف وسيطا تحريضيا إلى الآبار وأدخل تعليقا للخلايا الجذعية متعددة القدرات المشتقة من الدم ، أو BD-PSCs. يتم إنشاء هذه الخلايا ، القادرة على التمايز إلى أنواع مختلفة من الخلايا ، عن طريق إعادة برمجة الخلايا السلفية للدم.

احتضان الخلايا للالتصاق بالركيزة. تعمل عوامل النمو والعناصر الغذائية في وسط الحث على تحويل BD-PSCs إلى خلايا سلفة عصبية.

إدخال وسيط تمايز يحتوي على عوامل نمو الخلايا العصبية واحتضانه ، مما يؤدي إلى تمايز الأسلاف العصبية إلى نمط ظاهري عصبي ، وإظهار عمليات خلوية ممتدة واتصالات خلية خلوية.

ضع أغطية زجاجية في ألواح ذات 4 آبار وقم بتغطيتها ب 1 إلى 5 بولي إل أورنيثين مخفف في ماء مقطر مزدوج. بعد احتضان الأغطية عند 37 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة ، اغسلها بالماء المقطر المزدوج.

قم بإذابة 0.5 إلى 2 ملليغرام لكل ملليلتر من اللامينين ببطء ، وأضفه إلى الجزء العلوي من الغطاء. احتضنها عند 37 درجة مئوية لمدة ساعتين ، ثم قم بإزالة اللامينين الزائد عن طريق سحب العينات ، وأضف الوسط العصبي N2 إلى أطباق الاستزراع.

زراعة الخلايا السالبة CD45 المشت