تحضير ثقافات الشرائح العائمة الحرة من دماغ بشري بالغ

خذ أنسجة دماغية بشرية مغمورة في محلول تقطيع. يساعد الرقم الهيدروجيني البيولوجي والعناصر الغذائية للمحلول في الحفاظ على وظائف الأنسجة.

قم بإزالة طبقة السحايا الخارجية ، وقم بقص الأنسجة لإنشاء سطح مستو.

امسح المحلول الزائد من الأنسجة. قم بتوصيل الأنسجة المشذبة بقرص عينة بكتلة الاغاروز ، مع الحفاظ على الأنسجة على اتصال بالكتلة لسهولة التقسيم.

ضع القرص في صينية عازلة اهتزازية وقم بتغطية المنديل بمحلول تقطيع مثلج.

باستخدام الاهتزاز ، قم بإنشاء شرائح موحدة تحافظ على بنية الأنسجة.

تقليم الأنسجة الزائدة ، مما يضمن نسبة ثابتة من المادة الرمادية والبيضاء.

ضع الشرائح في طبق متعدد الآبار يحتوي على وسط ثقافة واحتضنها.

تظل الشرائح معلقة في الوسط لضمان وصول متساو إلى العناصر الغذائية ، وهي تقنية تعرف باسم ثقافة الشرائح العائمة الحرة.

تجديد الثقافة بانتظام بوسيط مكمل بعامل النمو العصبي للحفاظ على بقاء الأنسجة.

انقل العينة إلى طبق بتري يحتوي على محلول تقطيع. باستخدام أدوات جراحية دقيقة ، قم بإزالة أكبر قدر ممكن من السحايا المتبقية بعناية. اختر أفضل اتجاه للعينة لإنتاج شرائح ذات خصائص خاصة للتصميم التجريبي ، واستخدم شفرة مشرط رقم 24 لتقليم سطح مستو ليكون القاعدة التي سيتم لصقها على قرص العينة.

باستخدام ملعقة بلاستيكية يمكن التخلص منها وفرش طلاء دقيقة ، اجمع الجزء من طبق بتري ، وجفف المحلول الزائد بو