تقنية للحضانة المطولة للأنسجة العصبية في شبكية العين

0 مشاهدات3:30 د • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

خذ عين فأر سليمة في السائل الدماغي النخاعي الاصطناعي ، أو aCSF ، وقم بشق لعزل كوب العين الذي يحتوي على شبكية العين.

عالج بمحلول إنزيمي لإزالة الغشاء المحدد الداخلي ، مما يؤدي إلى تعريض الخلايا العصبية.

اغمر الأنسجة في محلول تثبيط لوقف الهضم ، واغسلها لإزالة المحلول الزائد.

ضع الأنسجة في حاضنة متخصصة على درجة حرارة منخفضة لإبطاء عملية التمثيل الغذائي الخلوي ، والحفاظ على الأنسجة.

تتكون هذه الحاضنة من غرفة رئيسية مع شبكة لتركيب الأنسجة. تمتلئ الغرفة ب aCSF ، ويتم التحكم في درجة حرارتها ودرجة الحموضة للحفاظ على وظائف الأنسجة.

للقضاء على التلوث الميكروبي ، يتم ضخ aCSF في غرفة أخرى ومعالجته بالأشعة فوق البنفسجية لقتل أي ميكروبات.

ثم يتم ضخ aCSF المعقم مرة أخرى إلى الغرفة الرئيسية.

لعزل شبكية العين ، قم بإزالة كوب العين ، وافصل شبكية العين عن الأنسجة المحيطة ، وأعدها إلى الحاضنة.

لتحضير الشبكية بالكامل ، قم على الفور باستئصال العينين من قتل رحيم. قم بعمل قطع صغير على طول أورا سيراتا ، وضع العينين إما في Ames Media أو aCSF مع إمداد الكربوجين في درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك ، قم بإزالة القرنية والعدسة والجسم الزجاجي على الفور عن طريق القطع على طول أورا سيراتا بمقص صغير ، وإزالتها باستخدام ملقط. ضع الأنسجة في نظام الحضانة في درجة حرارة الغرفة.

لإزالة الغشاء المحدد الداخلي ، انقل كوب العين الذي يحتوي على شبكية العين إلى وعاء زجاجي صغير يحتوي على غراء ، و L-cysteine ، و EDTA ، و DNAse عند 37 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة. ضع الكربوجين على المحلول من خلال الغطاء ، لكن لا تضع فقاعات. أوقف الهضم الأنزيمي عن طريق وضع الأنسجة في محلول بويضي ومحلول BSA لمدة 10 دقائق في Earl's BSS. ثم اغسل الأنسجة جيدا باستخدام aCSF.

بعد ذلك ، انقل الأنسجة إلى نظام الحضانة وخفض درجة الحرارة إلى حوالي 15 إلى 16 درجة مئوية. بعد ذلك ، نقل أنسجة الشبكية إلى المجهر. اعزل شبكية العين عن كوب العين ، وقم بتقطيعها إلى أربع قطع بشفرة حلاقة. إذا كانت شبكية العين بأكملها مطلوبة ، فقم بعمل أربع جروح صغيرة في محيط شبكية العين للسماح لها بالاستلقاء بشكل مسطح.

يمكن الآن نقل هذا النسيج إلى المجهر للفيزيولوجيا الكهربية ، أو الحفاظ عليه في حاضنة الدماغ. يتم الاحتفاظ بالأنسجة في الغرفة الرئيسية التي تحتوي على مجسات قياسات الأس الهيدروجيني ودرجة الحرارة. يتم عزل الغرفة الثانية من الغرفة الرئيسية وتتعرض لضوء UVC بقوة 1.1 واط من أجل تشعيع البكتيريا العائمة في المحلول. استخدم مضخة تمعجية لتدوير aCSF عبر الغرفتين ، ولوحة باردة كهروحرارية Peltier لتبريد أو تسخين الغرفة الرئيسية.

10:45

إعداد شرائح حادة من الحصين دورسال لتسجيل الخلية الكاملة وإعادة بناء الخلايا العصبية في Gyrus Dentate من الفئران الكبار

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

10:49

المجهر المسح الضوئي بالليزر البؤري لديناميكيات الكالسيوم في شرائح أنسجة البنكرياس الحادة للفأر

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

09:07

في الجسم الحي تصوير الكالسيوم للمجموعات العصبية في شبكات الخلايا العصبية الحسية الأولية في العقد الجذرية الظهرية السليمة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

13:02

لإعداد متفرقة الشبكية إلى سجل الاستجابة الخفيفة وراثيا من إعتبر خلايا الشبكية العقدة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:24

تثقافف الخلايا العصبية العقدية الشبكية مع التغليف الشمي الشمي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:15

التصوير متحد البؤر بفاصل زمني لديناميكيات التغصنات العصبية في استخلاصات شبكية الفأر

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:32

بروتوكول الأمثل لإعداد Wholemount الشبكية للتصوير والمناعية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

10:30

الحضانة لفترات طويلة الحادة العصبية الأنسجة للالكهربية والكالسيوم التصوير

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

12:56

منهجية للمحاكاة البيولوجية الكيميائية نيورومودوليشن من الفئران شبكية العين مع العصبي الغلوتامات في المختبر

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

05:52

على المدى الطويل، زراعة خالية من المصل من النباتات الشبكية الماوس Organotypic مع ظهارة صبغة الشبكية سليمة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 15 أغسطس 2026