تقنية للحضانة المطولة للأنسجة العصبية في شبكية العين

خذ عين فأر سليمة في السائل الدماغي النخاعي الاصطناعي ، أو aCSF ، وقم بشق لعزل كوب العين الذي يحتوي على شبكية العين.

عالج بمحلول إنزيمي لإزالة الغشاء المحدد الداخلي ، مما يؤدي إلى تعريض الخلايا العصبية.

اغمر الأنسجة في محلول تثبيط لوقف الهضم ، واغسلها لإزالة المحلول الزائد.

ضع الأنسجة في حاضنة متخصصة على درجة حرارة منخفضة لإبطاء عملية التمثيل الغذائي الخلوي ، والحفاظ على الأنسجة.

تتكون هذه الحاضنة من غرفة رئيسية مع شبكة لتركيب الأنسجة. تمتلئ الغرفة ب aCSF ، ويتم التحكم في درجة حرارتها ودرجة الحموضة للحفاظ على وظائف الأنسجة.

للقضاء على التلوث الميكروبي ، يتم ضخ aCSF في غرفة أخرى ومعالجته بالأشعة فوق البنفسجية لقتل أي ميكروبات.

ثم يتم ضخ aCSF المعقم مرة أخرى إلى الغرفة الرئيسية.

لعزل شبكية العين ، قم بإزالة كوب العين ، وافصل شبكية العين عن الأنسجة المحيطة ، وأعدها إلى الحاضنة.

لتحضير الشبكية بالكامل ، قم على الفور باستئصال العينين من قتل رحيم. قم بعمل قطع صغير على طول أورا سيراتا ، وضع العينين إما في Ames Media أو aCSF مع إمداد الكربوجين في درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك ، قم بإزالة القرنية والعدسة والجسم الزجاجي على الفور عن طريق القطع على طول أورا سيراتا بمقص صغير ، وإزالتها باستخدام ملقط. ضع الأنسجة في نظام الحضانة في درجة حرارة الغرفة.

لإزالة الغشاء المحدد الداخلي ، انقل كوب العين الذ