الزراعة المشتركة للحصين البطني والنواة Accumbens
موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 5:13 دقيقة • July 8th, 2025
ابدئي بقسم إكليلي في دماغ الفأر بعد الولادة يحتوي على منطقة الحصين البطنية، وهي منطقة داخل المنطقة السفلية من الدماغ.
قطع أنسجة الحصين البطنية ونقلها إلى وسط مناسب.
قم بتقطيع المنديل إلى قطع أصغر واتركه ملتصقا بغطاء مغلف بالمصفوفة في طبق متعدد الآبار.
تبدأ الخلايا العصبية من الأنسجة في تمديد الإسقاطات.
بعد ذلك ، خذ نواة متكئة مشتقة من جنين الفأر ، وهي نسيج صغير عميق داخل الدماغ الأمامي.
قطع أنسجة النواة المتكئة إلى قطع صغيرة. انقلهم إلى أنبوب.
أضف إنزيمات الهضم لفصل بروتينات المصفوفة خارج الخلية. يغسل لتقليل مستويات الإنزيم.
ماصة قطع الأنسجة لأعلى ولأسفل لتوليد خلايا مفردة.
الطرد المركزي الخلايا. قم بإزالة المادة الطافية وإعادة تعليق الخلايا.
أضف هذا التعليق إلى الغطاء مع أنسجة الحصين البطنية واحتضنها.
تتصل النهايات العصبية من قطعة أنسجة الحصين البطني بالخلايا العصبية للنواة المتكئة ، وتشكل تقاطع اتصال يسمى المشبك.
قبل جمع الأنسجة ، قم باحتضان الأغطية الزجاجية المطلية ب Poly-D-Lysine مقاس 12 ملم مسبقا في ألواح زراعة الأنسجة المكونة من 24 بئرا مع 500 ميكرولتر من وسائط الثقافة عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة على الأقل. ثم قم بإزالة الوسائط قبل طلاء الشرائح الدقيقة. لجمع الأنسجة للثقافة ، قم بإزالة الجزء العلوي من الجمجمة لفضح الدماغ بالكامل لكل جرو تم التضحية به.
تحت المجهر التشريحي
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية