موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:07 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بلوحة مغلفة ب ECM ومجموعات بذور من الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات في وسط نمو يحتوي على مثبطات Rho-kinase.
يعززECM ارتباط الخلايا ، بينما تمنع المثبطات Rho-kinases ، مما يمنع موت الخلايا المبرمج ويعزز بقاء الخلايا وتكاثرها.
إدخال وسيط تمايز عصبي للحث على تمايز الخلايا الجذعية إلى خلايا سلفية عصبية.
عالج بمحلول انفصال ؛ تعمل الإنزيمات الموجودة في هذا المحلول على تحلل ECM وتلامس الخلايا ، وتطلق الخلايا.
انقلها إلى قارورة غير مغلفة تحتوي على مثبطات رو-كيناز.
تسهل المثبطات بقاء الخلية والتجميع التلقائي في هياكل ثلاثية الأبعاد أو كرويات.
استكمل الكرويات بوسيط تمايز عصبي غني بعامل النمو ، مما يسمح للخلايا السلفية العصبية بالتمايز إلى أسلاف الخلايا النجمية وتشكيل الغلاف الفلكي.
بانتظام ، أضف محلول انفصال لفصل الغلاف الفلكي إلى مجموعات أصغر. هذا يسمح للمغذيات بالوصول إلى الخلايا الداخلية للكروية والحفاظ على صلاحيتها.
حافظ على الغلاف الفلكي في وسط جديد حتى تنضج الأسلاف إلى الخلايا النجمية.
ابدأ ببذر مجموعات من hPSCs في 2 مل من وسط hPSC الذي يحتوي على مثبط Rho-kinase Y-27632 في كل بئر من صفيحة من ستة آبار مطلية ب ECM. حافظ على الخلايا الجذعية حتى تصبح حوالي 50٪ ملتقية. بعد ذلك ، قم بتغيير الوسط إلى الوسط العصبي الذي يحتوي على SP-431542 و DMH1 لتعزيز الحث العصبي.
عندما تكون الخلا
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية