عزل الخلايا العصبية DRG والزراعة المشتركة مع سلائف خلايا شوان لتوليد خلايا شوان
موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 4:25 دقيقة • July 8th, 2025
خذ الحبل الشوكي لجنين الفئران مع عقدات الجذر الظهرية المرفقة ، أو DRGs ، التي تحتوي على الخلايا العصبية والخلايا الدبقية.
افصل DRGs الفردية عن الحبل ، وانقلها إلى أنبوب ، وجهاز طرد مركزي ، وتخلص من أي بقايا أنسجة.
أضف الإنزيمات لفصل الخلايا العصبية DRG والخلايا الدبقية.
قم بتدوير الخلايا وإزالة أي حطام. أضف وسيطا لصيانة الخلايا العصبية وثلاثي الأبعاد لتوليد معلق أحادي الخلية.
انقل المعلق إلى صفيحة دقيقة مطلية بركيزة ثقافة ، مما يعزز التصاق الخلية.
إدخال وسيط تنقية واحتضانه. تقضي العوامل المثبطة للوسط على الخلايا الدبقية المنقسمة بينما تعيش الخلايا العصبية غير المنقسمة.
خذ الخلايا الشبيهة بخلايا شوان ، أو SCLCs ، في وسط زراعة مشتركة. تتفاعل SCLCs ، مقدمة خلايا شوان ، مع الخلايا العصبية الطرفية الجنينية.
أدخل التعليق على الخلايا العصبية DRG واحتضانه. يعزز تفاعل SCLCs مع الخلايا العصبية DRG نضجها في خلايا شوان.
خلايا Schwann التي تم إنشاؤها جاهزة للتحليل.
لحصاد العقد الجذرية الظهرية ، انقل الجنين الأول إلى طبق مزرعة بطول 10 سم يحتوي على PBS بدرجة حرارة الغرفة تحت مجهر تشريح في وضع الانبطاح وأدخل ملقطا دقيقا على طول جانبي الحبل الشوكي.
باستخدام التشريح الحاد ، افصل الحبل الشوكي عن الأنسجة الرخوة المحيطة ، باستخدام ملقط لاستئصال الحبل الشوكي على طول فتحة الرقبة وكعب الذيل. قم بإزالة الأ
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية