إعادة طلاء الخلايا العصبية المتمايزة المشتقة من الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات

0 مشاهدات4:20 د • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ابدأ بلوحة ثقافة كبيرة تحتوي على خلايا عصبية متمايزة مشتقة من الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات مع شبكة عصبية كثيفة.

احتضان هذه الخلايا العصبية بإنزيمات محللة للبروتين خفيفة لفصلها عن اللوحة ، ورفعها على شكل ورقة.

مع استمرار الحضانة ، تعطل الإنزيمات جزئيا اتصالات الخلايا ، مما يؤدي إلى إرخاء الشبكات العصبية.

أضف وسيطا مزرعيا لإيقاف نشاط الإنزيم.

قم بتقطيع الخلايا العصبية المنفصلة بشكل متكرر لفصلها عن بعضها البعض.

قم بتصفية الخلايا العصبية من خلال مصفاة خلوية لإزالة كتل الخلايا وجمع الخلايا العصبية الفردية.

جهاز الطرد المركزي وإزالة المادة الطافية. أعد تعليقها في وسط النمو.

لإعادة الطلاء ، قم بزرع هذه الخلايا العصبية على بوليمر ولوحة متعددة الآبار مطلية بالبروتين اللاصق. احتضان للسماح بارتباطهم.

تستخدم

الخلايا العصبية العناصر الغذائية من الوسط لتظل قابلة للحياة. استبدل وسط المزرعة بانتظام للحفاظ على مستويات العناصر الغذائية.

احتضان أكثر للسماح بنضوج الخلايا العصبية وتشكيل الروابط بينهما.

ابدأ بشطف لوحة الخلايا العصبية المتمايزة برفق باستخدام PBS. قم بتفريق PBS أسفل جدار اللوحة ، وليس مباشرة على الخلايا لتجنب تعطيلها. استنشق PBS من حافة الطبق أثناء قلبه ، مع الحرص على عدم لمس الخلايا.

ضع ما لا يقل عن 1 ملليلتر من الإنزيم المحلل للبروتين لكل صفيحة طولها 10 سنتيمترات ، وأعد الخلايا إلى الحاضنة لمدة 40 إلى 45 دقيقة. أثناء الحضانة ، افحص الخلايا العصبية على مجهر تباين الطور ، واستمر في علاج البروتياز حتى تنفصل الشبكة العصبية تماما عن اللوحة وتبدأ في التفكك. عندما تنفصل الخلايا العصبية ، توقف عن الهضم بإضافة 5 ملليلتر من وسائط DMEM الطازجة لكل 1 مليلتر من البروتياز.

استخدم ماصة مصلية لتقليب الخلايا برفق على اللوحة من 5 إلى 8 مرات ، مع التأكد من عدم الضغط الشديد. قم بتصفية الخلايا من خلال شبكة 100 ميكرومتر في أنبوب مخروطي سعة 50 مليلتر قطرة قطرة ، واشطف المصفاة ب 5 ملليلتر إضافية من وسائط DMEM الطازجة.

استخدم جهاز طرد مركزي على الطاولة لتدوير الخلايا لأسفل عند 1,000 مرة جم لمدة 5 دقائق. بعد الطرد المركزي ، أعد الأنبوب المخروطي إلى خزانة السلامة الحيوية وشفط معظم الوسائط ، مع ترك 250 ميكرولترا للحفاظ على رطوبة الخلايا. أعد تعليق الخلايا برفق في 2 ملليلتر من وسائط DMEM الطازجة ، وقم بتمريرها عبر نهاية ماصة مصلية سعة 5 ملليلتر.

أخيرا ، اقلب الأنبوب من 2 إلى ثلاث مرات. استخدم مقياس كثافة الدم والتريبان الأزرق لحساب الخلايا القابلة للحياة ، ثم قم بتخفيف الخلايا باستخدام DMEM الطازج إلى التركيز المطلوب. أضف المكملات الغذائية المناسبة إلى الأنبوب اعتمادا على متطلبات خط الخلية المحدد ، واخلط الخلايا برفق عن طريق إمالة الأنبوب المخروطي 2 إلى 3 مرات.

قم بشفط طلاء اللامينين من صفيحة مكونة من 24 بئرا واشطفه مرة واحدة باستخدام PBS. قم بشفط PBS وتطبيق محلول الخلية على كل بئر بحركة على شكل ثمانية لتجنب التكتل. عند الانتهاء من طلاء الخلايا ، أعد اللوحة إلى الحاضنة التي تم ضبطها عند 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون.

09:31

الذهب Nanorod بمساعدة تحفيز البصري من الخلايا العصبية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:01

التمايز العصبي من الخلايا الجذعية الجنينية الماوس في المختبر

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

11:42

في المختبر النمذجة للأمراض العصبية باستخدام التحويل المباشر من الخلايا الليفية إلى خلايا السلف العصبية والتمايز إلى الخلايا الفلكية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

10:47

كفاءة اشتقاق أسلاف الإنسان متعلق بالخلايا العصبية والخلايا العصبية من افرة القوة الخلايا الجذعية الجنينية البشرية التعريفي مع جزيء صغير

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

07:27

بسرعة وكفاءة توليد الخلايا العصبية من الخلايا الجذعية المحفزة الإنسان في تنسيق اللوحة Multititre

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

04:33

تمييز الخلايا الجذعية متعددة القدرات المستحثة من قبل الإنسان إلى خلايا عصبية على مصفوفات الأقطاب الكهربائية الدقيقة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

02:16

تمييز الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات غير المعدلة وراثيا إلى خلايا سلفية عصبية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:21

تمايز الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات في الخلايا العصبية باستخدام فيروسات العدسات المهندسة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

06:40

توجه الدوبامين العصبية التمايز من الخلايا الجذعية المحفزة الإنسان

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

09:20

السريع العصبية تمايز الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات لقياس نشاط الشبكة على المصفوفات الدقيقة الكهربائي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 1 أغسطس 2026