إعادة طلاء الخلايا العصبية المتمايزة المشتقة من الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات

ابدأ بلوحة ثقافة كبيرة تحتوي على خلايا عصبية متمايزة مشتقة من الخلايا الجذعية البشرية متعددة القدرات مع شبكة عصبية كثيفة.

احتضان هذه الخلايا العصبية بإنزيمات محللة للبروتين خفيفة لفصلها عن اللوحة ، ورفعها على شكل ورقة.

مع استمرار الحضانة ، تعطل الإنزيمات جزئيا اتصالات الخلايا ، مما يؤدي إلى إرخاء الشبكات العصبية.

أضف وسيطا مزرعيا لإيقاف نشاط الإنزيم.

قم بتقطيع الخلايا العصبية المنفصلة بشكل متكرر لفصلها عن بعضها البعض.

قم بتصفية الخلايا العصبية من خلال مصفاة خلوية لإزالة كتل الخلايا وجمع الخلايا العصبية الفردية.

جهاز الطرد المركزي وإزالة المادة الطافية. أعد تعليقها في وسط النمو.

لإعادة الطلاء ، قم بزرع هذه الخلايا العصبية على بوليمر ولوحة متعددة الآبار مطلية بالبروتين اللاصق. احتضان للسماح بارتباطهم.

تستخدم

الخلايا العصبية العناصر الغذائية من الوسط لتظل قابلة للحياة. استبدل وسط المزرعة بانتظام للحفاظ على مستويات العناصر الغذائية.

احتضان أكثر للسماح بنضوج الخلايا العصبية وتشكيل الروابط بينهما.

ابدأ بشطف لوحة الخلايا العصبية المتمايزة برفق باستخدام PBS. قم بتفريق PBS أسفل جدار اللوحة ، وليس مباشرة على الخلايا لتجنب تعطيلها. استنشق PBS من حافة الطبق أثناء قلبه ، مع الحرص على عدم لمس الخلايا.

ضع ما لا يقل عن 1 ملليلتر من الإنزيم المحلل للبروتين لكل صفيحة طولها 10 سنتيمترات ، وأعد الخلاي