تطوير عضيات العصب الحركي البشري المشتقة من iPSC باستخدام رقاقة الموائع الدقيقة

0 views • 5:23 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

خذ الخلايا الجذعية متعددة القدرات المستحثة عن طريق الإنسان ، أو iPSCs ، في وسط الخلايا الجذعية الغنية بالمغذيات مع مثبطات رو-كيناز.

تدخل المثبطات الخلايا وتمنع إنزيمات Rho-kinase ، مما يمنع موت الخلايا المبرمجة.

تستخدم الخلايا العناصر الغذائية للتكاثر والتجمع تلقائيا لتشكيل مجموعة خلايا ثلاثية الأبعاد تسمى كروية.

تدريجيا ، استبدل الوسيط بوسيط تحريض عصبي. تعمل معدلات الإشارات من الوسط على تمايز الخلايا الجذعية إلى خلايا عصبية.

استبدل بوسط عصبي غني بعامل النمو لتفريق الخلايا الكروية إلى خلايا عصبية حركية وتشكيل خلية عصبية حركية كروية أو MNS.

انقل هذه MNS إلى شريحة ميكروفلويدية مطلية بالبوليمر تحتوي على وسط نضج.

تحفز عوامل نمو الأعصاب في الوسط المحاور أو الإسقاطات الأطول للخلايا العصبية على النمو من الكرة وتمتد عبر القناة الدقيقة للرقاقة.

هذا يشكل عصب حركي عضوي ، وهو نموذج ثلاثي الأبعاد للأنسجة العصبية الحركية.

للحث على تمايز خلايا iPS ثلاثية الأبعاد إلى خلايا عصبية حركية ، قم بزرع 4 × 104 خلايا iPS لكل بئر في العدد المناسب من الآبار لصفيحة قاع U ذات 96 بئرا في 100 ميكرولتر من وسط زراعة الخلايا المغذية والخالية من المصل مع 10 ميكرومولار Y27632.

في اليوم التالي ، استبدل المادة الطافية في كل بئر ب 100 ميكرولتر من وسط KSR مكملة ب 10 ميكرومولار SB-431542 و 100 نانومولار LDN-193189. في اليومين 2 و 3 ، استبدل المواد الطافية ب 100 ميكرولتر من وسط KSR مكملا ب 10 ميكرومولار SB-431542 ، و 100 نانومولار LDN-193189 ، و 5 ميكرومولار DAPT ، و 5 ميكرومولار SU-5402 ، و 1 حمض ريتينويك ميكرومولار ، وناهض واحد ناعم بالميكرومولار. في اليومين 4 و 5 ، استبدل المواد الطافية بمزيج من 75٪ من وسط KSR و 25٪ من وسط N2 ، مكملة ب 10 ميكرومولار SP-431542 ، و 100 نانومولار LDN-193189 ، و 5 ميكرومولار DAPT ، و 5 ميكرومولار SU-5402 ، و 1 حمض الريتينويك الميكرومولار ، و 1 ناهض ميكرومولار.

في اليومين 6 و 7 ، استبدل المواد الطافية بمزيج من 50٪ من وسط KSR و 50٪ من وسط N2 ، مع استكمال 5 ميكرومولار DAPT ، و 5 ميكرومولار SU-5402 ، و 1 حمض الريتينويك الميكرومولار ، و 1 ناهض ممنع ميكرومولار. في اليومين 8 و 9 ، استبدل المواد الطافية بمزيج من 25٪ من وسط KSR و 75٪ من وسط N2 ، مكملا ب 5 ميكرومولار DAPT ، و 5 ميكرومولار SU-5402 ، و 1 حمض الريتينويك الميكرومولار ، و 1 ناهض ميكرومولار ممنع. في اليومين 10 و 11 ، استبدل المواد الطافية بوسط N2 مكمل ب 5 ميكرومولار DAPT ، و 5 ميكرومولار SU-5402 ، و 1 حمض ريتينويك ميكرومولار ، و 1 ناهض ميكرومولار ممنع. في اليوم 12 ، استبدل المواد الطافية في كل بئر ب 100 ميكرولتر من وسط النضج ، مع استكمال 20 نانوغرام لكل مليلتر من عامل التغذية العصبية المشتق من الدماغ لكل بئر.

للحث على تكوين عضوي العصب الحركي ، استبدل محلول الطلاء في شريحة PDMS ب 150 ميكرولتر من وسط النضج المكمل ب 20 نانوغرام لكل مليلتر من عامل التغذية العصبية المشتق من الدماغ ، واستخدم طرف ماصة دقيقة عريضة التجويف لإضافة كرويات الخلايا العصبية الحركية برفق من بئر واحد من اللوحة المكونة من 96 بئرا إلى مدخل القناة الدقيقة للشريحة. ضع خزانا صغيرا من الماء المعقم بالقرب من شريحة زراعة الأنسجة في الطبق لمنع التبخر المتوسط ، وضع الطبق في حاضنة 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون.

كل يومين إلى ثلاثة أيام ، استبدل نصف وسط الاستزراع المستنفد من مركز الخزان المتوسط بوسط نضج طازج مكمل ب 20 نانوغرام لكل مليلتر من عامل التغذية العصبية المشتق من الدماغ. ستنمو المحاور من الخلايا العصبية الحركية الكروية إلى القناة ، وتتجمع تلقائيا في حزمة واحدة على مدى أسبوعين إلى ثلاثة أسابيع لتشكيل عصب عضوي حركي.

07:40

جيل المستمدة IPSC-Organoids الدماغ البشري لنموذج اضطرابات النمو العصبي في وقت مبكر

Related Videos

0 Views

09:34

إعادة تأهيل المحرك المنظم بعد عمليات نقل الأعصاب الانتقائية

Related Videos

0 Views

08:20

تصنيع قوي للأنسجة من أجل زراعة طويلة الأمد لعضويات الدماغ المشتقة من iPSC لأبحاث الشيخوخة

Related Videos

0 Views

06:46

تقسيم الخلايا العصبية المشتقة من الخلايا الجذعية البشرية داخل رقائق Microfluidic البلاستيكية التي تم تجميعها مسبقًا

Related Videos

0 Views

09:36

الأعضاء العصبية البشرية لدراسة سرطان الدماغ والأمراض العصبية

Related Videos

0 Views

10:20

جيل من iPSC الإنسان القائم على الدم في الدماغ حاجز رقاقة

Related Videos

0 Views

06:01

في المختبر العصبي العضلي تقاطع الناجمة عن الخلايا الجذعية متعددة القدرات المستحثة الإنسان

Related Videos

0 Views

09:57

ثلاثي الأبعاد موتور العصب الجهازية جيل

Related Videos

0 Views

10:48

جيل من وحدات السيارات البشرية مع تقاطعات العصبية والعضلية الوظيفية في الأجهزة Microfluidic

Related Videos

0 Views

10:16

توليد عضوي الدماغ من الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات في المفاعلات الحيوية المصغرة المصنوعة منزليا

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026