تطوير عضيات العصب الحركي البشري المشتقة من iPSC باستخدام رقاقة الموائع الدقيقة
موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 5:23 دقيقة • July 8th, 2025
خذ الخلايا الجذعية متعددة القدرات المستحثة عن طريق الإنسان ، أو iPSCs ، في وسط الخلايا الجذعية الغنية بالمغذيات مع مثبطات رو-كيناز.
تدخل المثبطات الخلايا وتمنع إنزيمات Rho-kinase ، مما يمنع موت الخلايا المبرمجة.
تستخدم الخلايا العناصر الغذائية للتكاثر والتجمع تلقائيا لتشكيل مجموعة خلايا ثلاثية الأبعاد تسمى كروية.
تدريجيا ، استبدل الوسيط بوسيط تحريض عصبي. تعمل معدلات الإشارات من الوسط على تمايز الخلايا الجذعية إلى خلايا عصبية.
استبدل بوسط عصبي غني بعامل النمو لتفريق الخلايا الكروية إلى خلايا عصبية حركية وتشكيل خلية عصبية حركية كروية أو MNS.
انقل هذه MNS إلى شريحة ميكروفلويدية مطلية بالبوليمر تحتوي على وسط نضج.
تحفز عوامل نمو الأعصاب في الوسط المحاور أو الإسقاطات الأطول للخلايا العصبية على النمو من الكرة وتمتد عبر القناة الدقيقة للرقاقة.
هذا يشكل عصب حركي عضوي ، وهو نموذج ثلاثي الأبعاد للأنسجة العصبية الحركية.
للحث على تمايز خلايا iPS ثلاثية الأبعاد إلى خلايا عصبية حركية ، قم بزرع 4 × 104 خلايا iPS لكل بئر في العدد المناسب من الآبار لصفيحة قاع U ذات 96 بئرا في 100 ميكرولتر من وسط زراعة الخلايا المغذية والخالية من المصل مع 10 ميكرومولار Y27632.
في اليوم التالي ، استبدل المادة الطافية في كل بئر ب 100 ميكرولتر من وسط KSR مكملة ب 10 ميكرومولار SB-431542 و 100 نانومولار LDN-193189. في الي
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية