JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأعصاب
0 مشاهدات • 2:20 د • July 8th, 2025
ابدأ بالخلايا الجذعية العصبية المزروعة على غطاء مغلف بمصفوفة خارج الخلية في وسط تمايز مناسب.
خذ حقنة تحتوي على بلازما باردة ، وهي حالة من المادة تحتوي على مكونات تفاعلية مختلفة ، بما في ذلك الأشعة فوق البنفسجية والجزيئات المشحونة.
ضع فوهة حقنة البلازما على ارتفاع معين فوق مزرعة الخلايا العصبية.
ابدأ نفاثة البلازما.
تتفاعل البلازما مع الخلايا الجذعية العصبية ، وتنشطها.
قم بإزالة وسط الثقافة القديمة. أضف وسيطا جديدا للثقافة واحتضن.
بمرور الوقت ، تنتج الخلايا الجذعية العصبية المنشطة إسقاطات.
تجاهل الوسيط.
تحت المجهر الضوئي ذو التباين المقلوب ، يشير وجود نتوءات ممدودة على الخلايا ، تشبه تلك الموجودة في الخلية العصبية ، إلى التمايز.
لمعالجة الخلايا الجذعية العصبية بالبلازما ، اضبط المسافة بين فوهة المحقنة والبئر الأول للخلايا على 15 ملم. استبدل المواد الطافية في مزارع الخلايا الجذعية العصبية ب 800 ميكرولتر من وسط التمايز الطازج ، وضع اللوحة تحت نفاثات البلازما.
تأكد من تثبيت فوهة المحقنة فوق مركز كل بئر ، وقم بإنشاء ثلاثة آبار بالبلازما لمدة 60 ثانية لكل معالجة ، وثلاثة آبار تحتوي على 1٪ هيليوم وغاز الأكسجين لمدة 60 ثانية لكل معالجة ، مع ترك ثلاثة آبار غير معالجة كضوابط. بعد ذلك ، استبدل المواد الطافية بمليلتر واحد من وسط التمايز الطازج ، وأعد الخلايا إلى الحاضنة لمدة ستة أيام. تحقق من حالة التمايز للمجموعات المختلفة يوميا تحت مجهر ضوئي تباين الطور المقلوب.
بعد العلاج ، اسمح للخلايا بالتوازن الكامل في الوسط المكيف لمدة ساعة تقريبا قبل استبدال المادة الطافية بوسط تمايز جديد.