موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 4:01 دقيقة • July 8th, 2025
خذ العقد الحسية المغسولة مسبقا في أنبوب.
أضف محلول تفكك يحتوي على خليط من الإنزيمات الهاضمة واحتضانه.
تقوم هذه الإنزيمات بتفكيك المصفوفة خارج الخلية ، وتطلق الخلايا الفردية.
بعد الحضانة ، قم بإزالة محلول التفكك.
اغسل العقد بمحلول فوسفات ، وأضف محلول تفكك جديد.
ماصة العقد لأعلى ولأسفل لفصل الخلايا.
مرر التعليق عبر مصفاة خلية لإزالة أي كتل.
اجمع أي خلايا متبقية من قاع المصفاة وضعها في الأنبوب.
ضع طبقة من تعليق الخلية فوق أنبوب متدرج الكثافة وجهاز طرد مركزي.
بناء على الاختلافات في الشكل والكتلة ، تهاجر الخلايا إلى الطبقة السفلية ، بينما يبقى الحطام الخلوي في الطبقة العليا.
تجاهل الطبقة العليا.
أضف وسيطا جديدا إلى تعليق الخلية المتبقي وجهاز الطرد المركزي.
تخلص من المادة الطافية وقم بتخزين خلايا العقد الحسية لمزيد من الاستخدام.
بعد حصاد العقد الحسية ، استنشق 500 ميكرولتر من محلول تفكك العقد من كل أنبوب دون إزعاج العقدات. بعد ذلك ، أضف 1 مليلتر من PBS إلى كل عينة وانتظر حتى تستقر العقد في قاع الأنابيب.
ثم قم بإزالة PBS وأضف 1 مليلتر من محلول تفكك العقد المكمل بإنزيم الهضم إلى الخلايا العصبية. احتضان الأنابيب عند 37 درجة مئوية للوقت المناسب ، بناء على عمر إنزيم الهضم ، وقم بهز الأنابيب ونقرها لفترة وجيزة كل 15 دقيقة لضمان تغطية العقد بمحلول الهضم.
أثناء هضم الخلايا العصبية ، أضف ببطء وحذر
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية