موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 4:02 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بالغلاف الدبقي ، وهي مجاميع الخلايا المشتقة من ورم في المخ أو الورم الأرومي الدبقي.
أضف إنزيمات التفكك. احتضان لفصل خلايا الورم الأرومي الدبقي والحصول على معلق أحادي الخلية.
بعد ذلك ، أدخل وسيطا مثقفا غني بالمصل لإيقاف نشاط الإنزيم.
جهاز الطرد المركزي وإزالة المادة الطافية ، ثم إعادة تعليق الخلايا.
قم بتصفية التعليق ، ثم جهاز الطرد المركزي وإزالة المادة الطافية.
أعد تعليق الخلايا في سلائف هيدروجيل تحتوي على ببتيدات صغيرة.
قم بتحميل هذا الخليط في الآبار باستخدام قالب سيليكون مجمع مسبقا يحتوي على حمض الهيالورونيك.
امزج المحلول. احتضان للسماح بالتفاعل بين حمض الهيالورونيك وسلائف الهيدروجيل ، وتشكيل هيدروجيل يسهل انحباس الخلايا.
تراكب الهيدروجيل بوسط الاستزراع للحفاظ على بقاء الخلايا.
بعد تفكيك القالب ، احتضان الهيدروجيل.
داخل الهيدروجيل ، تتفاعل بروتينات الالتصاق على الخلايا مع الببتيدات السليفة وحمض الهيالورونيك.
هذا يتسبب في تكوين الخلايا لمجموعات صغيرة وتطوير ثقافة ثلاثية الأبعاد.
للبدء ، ضع قوالب مطاط السيليكون النظيفة والجافة في كل بئر من صفيحة 12 بئرا غير معالجة بزراعة الأنسجة ، واستخدم الطرف الحاد النظيف لطرف الماصة للصق القوالب في قاع اللوحة. بعد فحص الختم بين القوالب وقيعان البئر ، اجمع كرات الورم الدبقي المنفصلة من زراعة خلايا الورم الأرومي الدبقي عن طريق الطرد المركزي
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية