توليد ثقافة عضوية من تعليق خلايا ورم الدماغ

ابدأ بأنبوب طرد مركزي دقيق يحتوي على مصفوفة خارج الخلية غنية باللامينين أو lrECM. Laminin هو مكون هيكلي موجود بكثرة في الدماغ.

احتفظ بالأنبوب على الجليد لمنع بلمرة IrECM.

أضف خلايا ورم الدماغ واخلطها جيدا لضمان توزيع موحد للخلايا.

بعد ذلك ، انقل الخليط إلى قوالب البارافيلم ، لتشكيل قطرات.

احتضان لتسهيل بلمرة lrECM لتشكيل سقالة تحاكي البيئة الطبيعية للخلايا.

الآن ، اغسل العضيات الصلبة في طبق بتري يحتوي على وسط ثقافة ، ثم احتضنها.

يوفر وسط الاستزراع العناصر الغذائية الأساسية وعوامل النمو ، مما يدعم انقسام الخلايا.

داخل العضوية ، تنظم الخلايا نفسها عن طريق الهجرة والغزو.

بعد الحضانة ، قم بإمالة اللوحة لتسوية العضيات.

قم بإزالة الوسط الزائد بعناية وأضف متوسطا جديدا.

احتضن مع رج لطيف.

هذا يوزع العناصر الغذائية بالتساوي ويعزز نمو العضوية.

لصنع عضيات من معلق أحادي الخلية ، أضف كمية مناسبة من المصفوفة خارج الخلية الغنية باللامينين أو lrECM في أنبوب طرد مركزي صغير في دلو ثلج أو كتلة باردة.

تحضير خليط خلوي يحتوي على 20,000 خلية لكل عضوي. امزج خليط معلق الخلية lrECM جيدا لتجنب ترسيب الخلايا ، مما قد يؤدي إلى تكوين عضوي غير منتظم. بعد ذلك ، قم بتقطيع 20 ميكرولترا من الخليط بعناية على قالب بارافيلم لتشكيل قطرة تشبه اللؤلؤ. تأكد من تبريد طرف الماصة كل اثنين إلى ثلاثة عضويات لمنع بلمرة lrECM.

بمج