توليد الخلايا العصبية والخلايا الدبقية من الأجسام الجنينية المشتقة من الخلايا الجذعية متعددة القدرات المستحثة عن طريق الإنسان

خذ الأجسام الجنينية ، أو EBs ، المشتقة من الخلايا الجذعية متعددة القدرات التي يسببها الإنسان. تتكون هذه الدرجات الكهربية من ثلاث طبقات جرثومي.

انقل EBs إلى طبق ثقافة مغطى بالمصفوفة يحتوي على وسط مناسب واحتضانه.

تمكن

المصفوفة EBs من التعلق بطبق الثقافة.

تسهل عوامل النمو والعناصر الغذائية في الوسط خلايا الأديم الظاهر في EBs لتشكيل مجاميع ظهارية عصبية مرتبة في نمط دائري يسمى الوردة.

قطع شظايا الوردة وفصلها عن الطبق.

اجمع الأجزاء وقم بتدويرها.

تخلص من المادة الطافية وأعد تعليق الشظايا.

باستخدام ماصة ، حرك الشظايا لأعلى ولأسفل لفصلها.

أضف العدد المطلوب من الخلايا إلى صفيحة بئر مطلية بالمصفوفة تحتوي على وسط تمايز.

تسهل مكونات وسط التمايز الخلايا الظهارية العصبية للتحول إلى خلايا عصبية ودبقية تعمل بكامل طاقتها ، وهي الخلايا الأولية للجهاز العصبي.

في اليوم الثاني ، قم بشفط محلول طلاء المصفوفة القياسي من طبق 60 مليلتر معد مسبقا ، وأضف 5 ملليلتر من وسط الحث الظهاري العصبي الكامل أو NRI إلى الطبق. العمل تحت المجهر المجسم بتكبير 4 أضعاف ، وباستخدام ماصة سعة 200 ميكرولتر ، اجمع حوالي 50 جسما جنينيا عائما ونقله إلى طبق مطلي واحد. ثم احتضن الطبق عند 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون.

في اليوم التالي ، اليوم الثالث من إجراء التمايز ، افحص الطبق تحت المجهر بتكبير 10 أضعاف للتأكد من أن جميع الأج