تمايز الخلايا الجذعية العصبية إلى الخلايا العصبية باستخدام جهاز موائع دقيقة مجزأ
موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 4:12 دقيقة • July 8th, 2025
خذ جهازا مائعا دقيقا يتكون من آبار خزان متصلة بمقصورتين ، جسدية ومحورية ، مفصولة بحاجز أخدود صغير.
المقصورات والأخاديد الدقيقة مطلية بركيزة زراعة الخلايا لتسهيل التصاق الخلية.
أضف وسيطا للخلايا الجذعية العصبية إلى كل بئر واحتضانه لتكييف الجهاز مسبقا لزراعة الخلايا.
تجاهل الوسائط. أضف الخلايا الجذعية العصبية ، أو الخلايا الجذعية العصبية ، إلى آبار الحجرة الجسدية واسمح للخلايا بالالتصاق.
أضف وسط NSC إلى كل بئر واحتضنه في غرفة مرطبة لمنع تبخر الوسائط. أثناء الحضانة ، تتكاثر NSCs.
استبدل وسيط NSC بوسيط تمايز عصبي واحتضانه.
تحفز الجزيئات الصغيرة في الوسط تمايز الخلايا العصبية العصبية إلى خلايا عصبية داخل المقصورة الجسدية ، مع امتداد محاورها عبر الأخاديد الدقيقة إلى الحجرة المحورية.
الخلايا العصبية المتمايزة ذات المحاور الممتدة جاهزة لمزيد من الفحوصات.
للبدء ، قم بإذابة poly-l-ornithine في الماء المقطر من فئة زراعة الخلايا لصنع 600 ميكرولتر من المحلول لكل شريحة. قم بشفط PBS المتبقي من الآبار ، مع التأكد من أن طرف الماصة بعيد عن فتحة القناة. قم بتحميل 150 ميكرولتر من محلول عمل بولي إل أورنيثين في البئر العلوي الأيمن.
انتظر لمدة 90 ثانية وأضف 150 ميكرولترا من المحلول إلى البئر السفلي الأيمن. انتظر خمس دقائق وكرر عملية التحميل مع محلول الآبار اليسرى. ثم ضع صينية المرطب مع الرقائق على حرارة
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية