تحضير أطباق الثقافة المجزأة المغلفة بالكولاجين لزراعة الخلايا العصبية

ابدأ بإضافة محلول الكولاجين إلى طبق الاستزراع.

يمنع الرقم الهيدروجيني الحمضي للمحلول تكوين مصفوفة الكولاجين.

قم بإزالة المحلول الزائد.

ضع الطبق في صينية مع وسادة شاش مبللة بهيدروكسيد الأمونيوم. ضع غطاء لاحتواء أبخرة الأمونيا.

هذه الأبخرة ترفع درجة الحموضة ، وتحييد البيئة الحمضية.

يعطل التحييد التنافر الكهروستاتيكي بين جزيئات الكولاجين ، مما يسمح لها بتكوين مصفوفة مستقرة. قم بإنشاء خدوش أفقية عبر المركز.

ضع شحم غير متفاعل على قاعدة غرفة مجزأة.

الآن ، نعلق السطح المخدوش من الطبق على الغرفة.

اقلب الشحوم وقم بتطبيقها لإغلاق المقصورة المركزية.

أضف وسائط للتحقق من التسرب. سد التسرب بالشحوم.

يشكل هذا نظاما من ثلاث مقصورات: المقصورة المركزية للخلايا العصبية والمقصورات الجانبية للأورام.

تنمو الخلايا العصبية على طول الخدوش إلى المقصورات الجانبية وتنتج غمدا من المايلين على المحاور ، مما يسهل دراسة تفاعل الخلايا السرطانية.

لتجميع أطباق الاستزراع المجزأة، قم بتخفيف محلول مخزون الكولاجين إلى 500 ميكروغرام لكل مليلتر في ماء مقطر معقم واخلطه جيدا. باستخدام ماصة نقل معقمة ، املأ طبق استزراع 35 ملم ب 2 مل من محلول الكولاجين المخفف. ثم قم بإمالة الطبق قليلا ، وقم بإزالة المحلول ، تاركا خلفه طبقة رقيقة من الكولاجين. استغني عن المحلول في الطبق التالي 35 ملم. كرر هذه العملية ، مع إضافة المزيد من محلول ا