عزل واستزراع الخلايا السليفة قليلة التغصن من قشرة دماغ جرو الفأر

0 مشاهدات4:39 د • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

خذ قشرة جرو الفأر.

أضف إنزيما محللا للبروتين يهضم المصفوفة خارج الخلية للنسجة. ثم ، قم بفصل الأنسجة ميكانيكيا ، وقم بفك الخلايا.

أضف الوسائط الدبقية و DNase لتحلل أي حمض نووي ملوث.

فصل الأنسجة ميكانيكيا لإطلاق الخلايا العصبية والخلايا الدبقية.

بمجرد أن يستقر النسيج غير المهضوم ، اجمع الوسائط التي تحتوي على الخلايا وأجهزة الطرد المركزي. قم بإزالة المادة الطافية.

أعد تعليق الخلايا في الوسائط الدبقية ووضعها على قارورة مصفوفة مغلفة بالبروتين خارج الخلية.

حضن. تلتصق الخلايا النجمية بالسطح المطلي بقوة أكبر من الخلايا الأخرى. تعزز الوسائط الدبقية بقاء الخلايا الدبقية فقط.

استبدل الوسائط لإزالة الحطام.

احتضان مع الاهتزاز لفصل الخلايا السليفة قليلة التغصن المغطاة ، OPCs ، والخلايا الدبقية الصغيرة.

انقل الوسائط مع الخلايا إلى لوحة ثقافة.

احتضان مع الاهتزاز لتسهيل التصاق الخلايا الدبقية الصغيرة التفاضلية.

انقل المادة الطافية OPC غير الملتصقة إلى صفيحة متعددة الآبار مطلية ب poly-D-lysine. احتضان للالتزام OPC.

استبدل الوسائط بوسائط OPC ، مما يسمح بنمو OPC.

أضف 1 مليلتر من 0.05٪ تريبسين مع 0.53 مللي مولار EDTA إلى كل أنبوب به أنسجة. قم بثلاثية الخليط بماصة سعة 10 ملليلتر حوالي 20 مرة. ثم انقل معلق الخلية إلى أنبوب مخروطي فارغ سعة 50 ملليلترا.

احتضن المحلول عند 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون لمدة 15 دقيقة ، مع تحريك المحللات برفق بعد ثماني دقائق. بعد الحضانة ، أضف 5 ملليلتر من MGM ، و 200 ميكرولتر من DNase-I إلى كل أنبوب للحصول على تركيز نهائي يبلغ 50 ميكروغرام لكل مليلتر. قم بترقيم كل محللة 10 مرات باستخدام ماصة سعة 10 ملليلتر.

بعد ذلك ، اترك معلق الخلية لمدة ثلاث دقائق في درجة حرارة الغرفة للسماح للأنسجة غير المنفصلة بالاستقرار في قاع الأنبوب. انقل معلقات الخلية إلى أنابيب مخروطية جديدة سعة 50 مليلتر ، تاركة وراءها الأنسجة غير المنفصلة. بعد الطرد المركزي ، قم بتعليق حبيبات الخلية في 5 ملليلتر من MGM وقم بترتيبتها 20 مرات.

ضع معلقات الخلية على قوارير T-25 المطلية ، واحتضن الخلايا عند 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون. لإجراء عزل الخلايا السليفة قليلة التغصن ، رج الخلايا لمدة 15 ساعة. ثم قم بإزالة المادة الطافية من القارورة ووضعها على طبق بتري معقم.

احتضان المادة الطافية عند 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيد الكربون لمدة 30 دقيقة ، مع الدوران بعد 15 دقيقة لإزالة الخلايا الدبقية الصغيرة المتبقية. إزالة الخلايا الطافية غير الملتصقة. عد الخلايا وقم بوضعها على سطح مطلي ب poly-D-lysine بالتركيز المطلوب.

أعد الخلايا إلى الحاضنة لمدة ساعة واحدة على الأقل. بعد ذلك ، قم بشفط 95٪ من الوسائط برفق وأضف وسائط OPC الدافئة ببطء ، وقم بسحب ماصاتها على جدار البئر لتقليل اضطراب OPCs.

10:00

إنتاج واستخدام الفيروسة البطيئة إلى خلايا انتقائي تنبيغ الابتدائية دبقية قليلة التغصن السلائف ل في المختبر فحوصات تكون الميالين

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

09:05

جيل من Oligodendrocytes وOligodendrocyte- متوسطة مكيفة للتجارب الثقافة المشتركة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

09:36

عالية المحتوى فحص التمايز وتحليل النضج من الجنين والكبار الخلايا الجذعية العصبية المشتقة من ثقافات الخلايا السليفة Oligodendrocyte

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

18:17

الاشتقاق الثقافات Oligodendrocyte المخصب وOligodendrocyte نيورون / Myelinating المشارك من الثقافات في مرحلة ما بعد الولادة مناديل الفئران

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

14:26

السلف المستمدة من نظام الثقافة دبقية قليلة التغصن من دماغ الجنين البشري

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

04:15

الحصول على مزرعة مختلطة من الخلايا الدبقية قليلة التغصن والخلايا النجمية من الخلايا الجذعية العصبية للفئران البالغة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:06

عزل الخلايا قليلة التغصن الأولية في الفئران باستخدام الخرز المناعي المغناطيسي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

04:47

عزل واستزراع الخلايا من الدماغ الظهري الجانبي لجنين الفأر

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

11:25

العزلة وثقافة الخلايا النجمية الماوس القشرية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

11:11

التحضير للثقافات الجرذ دبقية قليلة التغصن السلف والكمي لOligodendrogenesis عن طريق ثنائي الأشعة تحت الحمراء الضوئي الإسفار

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 15 أغسطس 2026