موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 7:57 دقيقة • July 8th, 2025
خذ فأرا حاملا معدلة وراثيا وقم بإزالة الرحم جراحيا باستخدام أجنة تحتوي على خلايا عصبية حركية مصنفة بالفلورسنت.
انقل الرحم إلى طبق به عازل مثلج تحت المجهر الفلوري.
استخدم الضوء المرئي لعزل الأجنة.
قم بإزالة وجه وذيل الأجنة وتوجيهها إلى وضعية الانبطاح.
باستخدام إشارة التألق ، قم بعمل شق في الدماغ الأوسط لكشف النوى الحركية للعين والبوقل ، والتي تحتوي على الخلايا العصبية الحركية.
عزل الدماغ المتوسط الذي يحتوي على النوى.
افتح الجانب الظهري من الدماغ الخلفي والحبل الشوكي. اعزل الحبل الشوكي ، واستئصال كلا الطرفين ، وجمع الأعمدة التي تحتوي على الخلايا العصبية الحركية الشوكية.
عالج الأنسجة المجمعة بالإنزيمات لفصل مصفوفة الأنسجة. حصاد الخلايا المفردة وعزل الخلايا العصبية المصنفة بالفلورسنت باستخدام FACS.
أضف وسيطا للثقافة إلى الخلايا العصبية المعزولة ، وانقل الخلايا إلى صفيحة دقيقة مطلية بالركيزة المزروعة ، واحتضانها ، مما يسمح للخلايا بالالتصاق والنمو.
الحفاظ على الخلايا العصبية الحركية في الثقافة.
ابدأ بحصاد الأجنة الإيجابية ل Islet-1 EGF من فأر حامل بعد حوالي 11.5 يوما من الإخصاب. رش البطن جيدا بالإيثانول ، وقم بإزالة الرحم بمقص تشريح مجهري معقم وملقط تضميد الإبهام. اغسل الرحم لفترة وجيزة في PBS معقم. ثم انقله إلى لوحة التشريح المملوءة ب PBS المعقم المبرد مسبقا.
تحت الضوء الساطع للمجهر ،
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية