تمييز الخلايا الجذعية العصبية البشرية إلى أسلاف عصبية وخلايا نجمية

ابدأ بالمجالات العصبية غير الملتصقة ، وهي مجموعة ثلاثية الأبعاد من الخلايا الجذعية العصبية البشرية في وسط مكيف مشتق من زراعة الخلايا.

يحتوي هذا الوسيط على العناصر الغذائية وعوامل النمو ومكونات المصفوفة خارج الخلية التي تحافظ على بقاء الخلية.

جهاز طرد مركزي لجمع المجالات العصبية.

عالجها بإنزيمات التربسين و DNase ، واخلط المحتويات ، ثم احتضنها.

يعطل التربسين الالتصاق من خلية إلى أخرى ويسهل انفصال الخلايا ، بينما يحلل DNase الحمض النووي الحر لمنع تكتل الخلايا.

ماصة المحتويات بشكل متكرر لتشكيل تعليق أحادي الخلية. ثم أضف مثبط التربسين لتحييد نشاط الإنزيم.

جهاز الطرد المركزي وإزالة المادة الطافية ، ثم إعادة تعليق الخلايا في وسط تكاثر يحتوي على عوامل النمو العصبي.

ضع معلق الخلية على غطاء مطلي بالبوليمر يوضع في صفيحة متعددة الآبار. احتضان للسماح بارتباط الخلايا الجذعية بالبوليمر.

علاوة على ذلك ، بناء على امتصاص عوامل نمو محددة ، تتمايز الخلايا الجذعية إلى أسلاف عصبية وخلايا نجمية ، وهي جاهزة لمزيد من النضج إلى أنواع خلايا متخصصة.

بعد تحضير وسط الاستزراع وطلاء الخلايا الجذعية العصبية البشرية وفقا لبروتوكول النص ، استرجع من الحاضنة قارورة الخلايا المراد تمريرها ، وأدخلها إلى خزانة السلامة الحيوية أو BSC. قم بإمالة القارورة برفق ، مما يسمح للخلايا بالغرق في قاع الوسط المجمع.

انقل 10 ملليلتر م