توليد عضيات دماغية من النوع الأمامي من الخلايا الجذعية متعددة القدرات التي يسببها الإنسان

تبدأ مع لوحة بئر منخفضة التعلق تحتوي على الخلايا الجذعية متعددة القدرات التي يسببها الإنسان أو iPSCs في وسط الخلايا الجذعية المكملة بمثبط رو-كيناز.

تدخل المثبطات إلى الخلايا ، وتمنع إنزيمات Rho-kinase ، وتحافظ على صلاحية الخلية. هذا يعزز تشكيل مجاميع iPSC.

استبدل الوسط بوسط خلية جذعية للسماح للركام بالنمو. انقلها إلى طبق ثقافة منخفض التعلق بوسط حث قشري.

مكونات هذا الوسيط يسبب iPSCs للتمايز إلى خلايا الأديم الظاهر العصبي, السلائف العصبية.

انقل كل ركام للأديم الظاهر العصبي إلى فيلم به آبار ضحلة.

استبدل الوسط بمصفوفة غشاء قاعدية واحتضانه للسماح بتصلب المصفوفة واحتجاز الركام.

انقل هذه الركام المضمنة في المصفوفة إلى طبق يحتوي على وسط تحريض قشري واحتضانه بالتحريض.

بمرور الوقت ، تستخدم خلايا الأديم العصبي الظاهر عوامل التمايز وتتطور إلى خلايا ظهارية عصبية.

قم بتغيير الوسط إلى وسيط تمايز عضوي ، مما يسمح للخلايا بالنضوج إلى أنواع خلايا أكثر تخصصا ، وتشكيل عضوية دماغية تشبه قشرة الدماغ الأمامي.

لتوليد مجاميع الخلايا الجذعية متعددة القدرات ، عندما تصل مزارع الخلايا الجذعية إلى 70٪ إلى 90٪ من التقاء ، أضف 500 ميكرولتر من كاشف تفكك الخلايا إلى بئر واحد من لوحة الثقافة المكونة من ستة آبار لفصل الخلايا.

الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات ، والتي تتكيف مع ظروف زراعة أحادية الطبقة ، هي نوع جيد