الزراعة المشتركة لخلايا شوان مع الخلايا العصبية DRG على غشاء ممتد مسبقا
موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:44 دقيقة • July 8th, 2025
خذ غرفة سيليكون متصلة بغشاء سيليكون مطلي بمصفوفة.
أضف العقد الجذرية الظهرية أو تعليق خلية DRG واحتضنها.
تعززالمصفوفة ارتباط الخلية وضربها ، بينما يوجه السطح الممتد محاذاة المحاور العصبي.
أضف مثبطات النمو التي تقضي على الخلايا الدبقية المنقسمة بنشاط ، مما يسمح للخلايا العصبية غير المنقسمة بالبقاء على قيد الحياة.
قم بإزالة الوسيط. أضف وسط نمو واحتضن.
تستشعر الخلايا العصبية زيادة تصلب الغشاء في الاتجاه الممتد وتوجه نمو المحور العصبي وفقا لذلك.
أضف خلايا Schwann المستنبتة والمحصودة إلى ثقافة DRG واحتضنها.
ترتبط خلايا شوان بالمحور العصبي المتجدد ، مما يعزل الخلايا العصبية.
هذا يعزز بقاء الخلايا العصبية ووظائفها ، وإنشاء ثقافة مشتركة.
قبل زرع الخلايا العصبية DRG ، قم بإزالة محلول PLL من الغرفة. اشطف سطح PDMS بالماء المعقم وجففه بالهواء. بعد إعادة تعليق الخلايا ، اترك التعليق لمدة 1 إلى 2 دقيقة للسماح للحطام بالاستقرار في قاع الأنبوب. بعد ذلك ، أضف 1.5 مل من تعليق الخلية في كل غرفة تمدد ، واحتضنها عند 37 درجة مئوية مع 5٪ ثاني أكسيدالكربون 2.
للقضاء على الخلايا الدبقية في يوم واحد في المختبر ، أضف 10 ميكرولتر أو 15 ميكرولترا من محلول مخزون خليط FdU / U إلى كل بئر. بعد 7 ساعات ، استبدل هذه الوسيطة بوسط نمو قياسي جديد ، وضع جهاز الاستزراع الممتد مسبقا في حاضنة 37 درجة مئوية في 5٪ ثاني أكسيد
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية