توليد الخلايا البطانية الدماغية من الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات
موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 4:35 دقيقة • July 8th, 2025
خذ مزرعة الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات ، أو iPSC ، في وسط الصيانة التي تحتوي على مثبطات rho-kinas.
تحافظ عوامل النمو على الخلايا غير متمايزة ، بينما تعزز مثبطات rho-kinase بقاء الخلايا.
استبدل الوسائط بوسائط صيانة جديدة ، وإزالة مثبطات rho-kinas. احتضان وتعزيز تكوين المستعمرة.
استبدال بانتظام مع وسائط غير مشروطة, الذي يوفر بيئة خاضعة للرقابة, يؤدي إلى تمايز iPSC إلى أسلاف عصبية ثم الخلايا البطانية في الدماغ, تليها تكاثر الخلايا.
استبدلها بوسائط الخلايا البطانية التي تحتوي على حمض الريتينويك وعوامل نمو الخلايا الليفية. حضن.
تعمل عوامل نمو الخلايا الليفية على تسهيل تكاثر الخلايا ، بينما يعزز حمض الريتينويك نضوج الخلايا البطانية في الدماغ.
أضف الإنزيمات المحللة للبروتين لفصل الخلايا. اجمع الخلايا وأجهزة الطرد المركزي. تخلص من المادة الطافية.
أعد تعليق الخلايا في الوسط البطاني وزرعها في غشاء متعدد الآبار مغطى بالكولاجين والفيبرونكتين.
يحتوي البئر على وسائط بطانية. احتضان التصاق الخلايا البطانية الانتقائية للدماغ.
استبدل الوسائط بوسائط بطانية غير مكملة لمزيد من التجارب.
أعد تعليق 7.5 × 105 خلايا في 12 مل من وسط صيانة الخلايا الجذعية و 10 مثبطات ROCK ميكرومولار. شفط مصفوفة من قارورة T75 ونقل تعليق الخلية إلى القارورة. رج القارورة لتوزيع الخلايا ، وضعها في الحاضنة.
قم بتحديث الو
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية