عزل الخلايا الجذعية المشتقة من الدهون من الأنسجة الدهنية الفئران حول الأبهر

خذ الأنسجة الدهنية حول الأبهر المعدلة وراثيا المحصودة التي تحتوي على خلايا جذعية مشتقة من الدهون تعبر عن البروتين الفلوري تنحدر من خلايا القمة العصبية ، أو NCCs.

أضف وسائط الهضم وافرم الأنسجة.

انقل الأنسجة المفرومة مع وسائط الهضم إلى أنبوب. فصل الشظايا ميكانيكيا.

حضن. يهضم الكولاجيناز في الوسائط المصفوفة خارج الخلية للأنسجة ، ويطلق الخلايا الجذعية والخلايا الشحمية والخلايا الليفية.

أضف وسائط تحتوي على مصل لإيقاف نشاط الكولاجيناز. جهاز الطرد المركزي والتخلص من المادة الطافية التي تحتوي على الخلايا الشحمية.

قم بإعادة تعليق الخلايا في الوسائط، وقم بالتصفية لإزالة الركام.

الطرد المركزي المرشح وإزالة المادة الطافية. أعد تعليق الخلايا في محلول تحلل كريات الدم الحمراء لتحلل كريات الدم الحمراء.

أضف المخزن المؤقت المحتوي على المصل لإيقاف التحلل. جهاز الطرد المركزي والتخلص من المادة الطافية.

إعادة تعليق الخلايا في المخزن المؤقت.

إجراء فرز الخلايا المنشطة بالفلورة لعزل الخلايا الجذعية الفلورية.

يمكن استخدام الخلايا الجذعية المعزولة لمزيد من التجارب.

انقل الأنسجة الدهنية المحصودة إلى أنبوب طرد مركزي دقيق جديد سعة 2 مليلتر ، يحتوي على 1 مليلتر من وسط الهضم المحضر حديثا ، واستخدم المقص الجراحي لفرم الأنسجة. انقل ملاط الأنسجة إلى أنبوب سعة 50 مليلتر يحتوي على 9 ملليلتر من وسط الهضم الطازج ، واستخ