موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 4:52 دقيقة • July 8th, 2025
خذ جزءا من الأمعاء الدقيقة للفأر تم تجريده سابقا من العضلة الطولية والضفيرة العضلية المعوية ، والطبقات التي تحتوي على الخلايا العصبية المعوية ، والخلايا الدبقية.
اقطع المنديل وضعه في مخزن مؤقت يحتوي على EDTA. احتضان مع الهزاز.
يعطل EDTA تقاطعات الخلايا الخلوية ، ويفصل الغشاء المخاطي الظهاري عن الصفيحة المخصوصة الأساسية وتحت الغشاء المخاطي ، وهي طبقات النسيج الضام التي تحتوي على الخلايا الدبقية المعوية.
الماصة مرارا وتكرارا لإخراج الخلايا الظهارية.
قم بالتصفية من خلال مصفاة الخلية وتخلص من التدفق.
انقل الأنسجة إلى مخزن مؤقت للتفكك غير الأنزيمي واحتضانه بالهزاز. يعمل المخزن المؤقت للتفكك على إرخاء الصفيحة المخصوصة والمصفوفة خارج الخلية تحت المخاطية ، مما يؤدي إلى فصل الخلايا.
الماصة مرارا وتكرارا لفصل الخلايا بشكل أكبر.
قم بالتصفية من خلال مصفاة الخلية لجمع الخلايا.
جهاز الطرد المركزي وإعادة تعليق الخلايا في مخزن مؤقت.
خذ آبارا مغلفة بالبروتين الالتصاق تحتوي على وسط نمو دبقي وقم بلوحة الخلايا.
يسهل الطلاء التصاق الخلايا ، بينما تعزز عوامل النمو بشكل انتقائي تكاثر الخلايا الدبقية ، مما يؤدي إلى إنشاء صفيحة خاصة وثقافة الخلايا الدبقية تحت المخاطية.
لإزالة الغشاء المخاطي الظهاري ، استخدم أولا مقصا دقيقا لتقطيع الأمعاء إلى قطع يبلغ طولها حوالي 0.5 سم وجمع القطع في 30 مل من محلول EDTA / H
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية