موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:28 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بمدافع الهاون الزجاجية الباردة التي تحتوي على أنسجة دماغية قشرية للفئران ، وهي الطبقة الخارجية في الدماغ.
أضف عازلة للأوعية الدقيقة في الدماغ أو BMB ، تحتوي على مثبطات البروتياز.
الآن ، حرك المدقة لأعلى ولأسفل لفصل الأنسجة.
يطلق هذا التحريض وحدات الأوعية الدموية العصبية ، أو NVUs ، التي تتكون من الأوعية الدقيقة والخلايا المحيطة والخلايا العصبية والخلايا الدبقية. تمنع مثبطات الإنزيم البروتياز التي تم إطلاقها ، مما يحمي الأوعية الدقيقة.
انقل هذا الخليط إلى أنبوب.
أضف محلول عديد السكاريد الكثيف. استخدم دوامة لخلط المحلول مع المحتويات الأخرى بشكل موحد.
الطرد المركزي. تسمح السكريات الكثيفة بترسيب NVUs ، وهي أكثر كثافة من بقايا الأنسجة.
تخلص من المادة الطافية وأعد تعليق NVUs في BMB الذي يحتوي على مثبط البروتياز ومحلول عديد السكاريد.
استخدم الدوامة لخلط المحتويات.
كرر عملية الطرد المركزي. تخلص من المادة الطافية لإزالة أي بقايا من الحطام.
قم بتعليق NVUs في BMB وتخزينها لمزيد من التحليل.
ضع أنسجة المخ القشرية في هاون زجاجي مبرد. ثم أضف 5 مل من BMB مع كوكتيل مثبط البروتياز. باستخدام الخالط الكهربائي العلوي ، أدخل مدقة في الملاط وقم بتجانس أنسجة المخ باستخدام 15 ضربة لأعلى ولأسفل عند 3,700 دورة في الدقيقة. ثم صب الجانس في أنابيب الطرد المركزي المسماة. بين العينات ، استخدم 70٪ إيثانول لتن
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية