موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 5:34 دقيقة • July 8th, 2025
خذ جزءا من العمود الفقري للفأر وقسمه لإزالة الحبل الشوكي.
افصل العقد الجذرية الظهرية ، أو DRGs ، وهي مجموعة من الخلايا العصبية محاطة بالخلايا الدبقية الساتلية ، أو SGCs.
ضع DRGs في وسط النمو. قم بإزالة جذور الأعصاب لتقليل تلوث SGC.
عالج بالكولاجيناز لتحلل مصفوفة الأنسجة وغسلها لإزالة الإنزيمات.
إدخال التربسين لتعطيل الاتصالات بين الخلايا. أضف مصلا يحتوي على بروتينات تعطل التربسين.
أضف وسط النمو وفصل الأنسجة ميكانيكيا. قم بتصفية المعلق لعزل الخلايا المفردة وأجهزة الطرد المركزي لإزالة بقايا الأنسجة.
أعد تعليق الخلايا لوضعها على وسط تدرج الكثافة ، وجهاز طرد مركزي.
تستقر الخلايا العصبية ذات الكثافة الأعلى في القاع ، مما يسهل فصل SGCs.
أعد تعليق الخلايا العصبية في وسط الثقافة. انقلها إلى بئر مزرعة مطلية بالركيزة ، مما يسمح بربط الخلية.
مكمل مع عوامل نمو الأعصاب لبقاء الخلايا العصبية.
للحصول على الخلايا العصبية DRG بعد حصاد الحبل الشوكي ، ابدأ بإزالة أي أجزاء ظهرية ثم استخدم مقصا جراحيا معقما وحادا لتقسيم العمود الفقري إلى نصفين على طول المحور الطولي ، مما يؤدي إلى تعريض أنسجة الحبل. قم بقطع العمود الفقري إلى جزأين أصغر تحت مستوى القفص الصدري ، ثم استخدم ملقطا دقيقا لإزالة جميع أنسجة الحبل السري برفق ، مع الحرص على عدم سحب وإزالة جذور DRG ، والتي تظهر على شكل خيوط بيضاء تخرج مباشرة من ال
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية