عزل واستزراع الخلايا العضاقية للفأر

أضف عازلة إلى أنسجة دماغ الفأر وتجانسها لتحرير الخلايا والأوعية الدقيقة.

بعد ذلك ، أضف محلول BSA-dextran إلى المتجانس. امزج وجهاز طرد مركزي لفصل المكونات. تخلص من المادة الطافية.

أعد تعليق الأوعية الدقيقة في المخزن المؤقت ، وقم بتمريرها عبر مرشح ، وقم بإزالة الأوعية الكبيرة.

الآن ، قم بالطرد المركزي للمرشح وإزالة المادة الطافية. أعد تعليق الأوعية الدقيقة في المخزن المؤقت الذي يحتوي على الحمض النووي.

أضف الإنزيمات المحللة للبروتين لإطلاق الخلايا البطانية والفطرات المحيطية.

DNتتحلل DNA.

أضف المخزن المؤقت الذي يحتوي على BSA لإيقاف نشاط الإنزيم. جهاز الطرد المركزي والتخلص من المادة الطافية.

أعد تعليق الخلايا في الوسائط وقم بوضعها على صفيحة متعددة الآبار مطلية بمصفوفة الطابق السفلي. احتضان وتعزيز التصاق الخلايا.

قم بتغيير الوسائط بانتظام.

تشكل الخلايا البطانية طبقة أحادية وتدعم نمو السعي.

يعزز مرور الخلايا اللاحق في وسط الحمض على صفيحة متعددة الآبار المطلية بالجيلاتين نمو الخلايا المحيطية مع القضاء على الخلايا البطانية.

ابدأ بوضع الدماغ من فأر ذكر C57 Black 6 الخالي من مسببات الأمراض يبلغ من العمر أربعة إلى ستة أسابيع على منديل معقم وجاف وخالي من النسالة واستخدام ملقط طرف منحني لإزالة الأعصاب المخيخية والمخطط والأعصاب القذالية. استخدم قطعة قطن لإزالة جميع السحايا المرئية ، واقلب أنسجة ا