الحصول على معلق أحادي الخلية من أنسجة الحصين في الفأر

خذ شظايا فرس النهر الفأر البالغ المنفوخة في أنبوب تفكك يحتوي على غراء و DNase.

ضع الأنبوب على مفكك ميكانيكي.

يقوم المفكك بتفكيك الأنسجة ميكانيكيا ، وتخفيف الخلايا ، بما في ذلك الخلايا العصبية والخلايا الدبقية.

يكسر غراء المصفوفة خارج الخلية للأنسجة ، ويطلق الخلايا. يتحلل DNase من الحمض النووي الملوث

أضف المخزن المؤقت الذي يحتوي على BSA ، مما يؤدي إلى تعطيل الإنزيمات.

مرر التعليق عبر مصفاة لإزالة الحطام الكبير.

الطرد المركزي المرشح. تخلص من المادة الطافية الغنية بالإنزيم.

أعد تعليق الخلايا في المخزن المؤقت ، وانقلها إلى أنبوب جديد.

أضف وسائط تدرج الكثافة ، واخلط الخليط وقم بتراكبه مع المخزن المؤقت.

أثناء الطرد المركزي ، تشكل الخلايا والحطام طبقات منفصلة بناء على كثافتها.

قم بإزالة الطبقة العازلة العلوية وطبقة الحطام الوسطى.

أضف المخزن المؤقت إلى الطبقة السفلية التي تحتوي على الخلايا واخلطها. جهاز الطرد المركزي والتخلص من المادة الطافية التي تحتوي على وسائط تدرج الكثافة.

أعد تعليق خلايا الحصين في المخزن المؤقت لمزيد من التحليل.

باستخدام الملقط ، انقل قطع أنسجة الحصين إلى أنبوب C ، وأضف 30 ميكرولترا من مزيج الإنزيم 2 في الأنبوب. بعد لف الغطاء وتشديده حتى ينقر ، ضع الأنبوب في جهاز الفصل ، وقم بتشغيل البرنامج المناسب. أثناء تشغيل البرنامج ، قم بترطيب مصفاة خلية 70 ميكرون مسبقا موضوعة عل