الحصول على معلق أحادي الخلية من أنسجة الحصين في الفأر

0 مشاهدات3:42 د • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

خذ شظايا فرس النهر الفأر البالغ المنفوخة في أنبوب تفكك يحتوي على غراء و DNase.

ضع الأنبوب على مفكك ميكانيكي.

يقوم المفكك بتفكيك الأنسجة ميكانيكيا ، وتخفيف الخلايا ، بما في ذلك الخلايا العصبية والخلايا الدبقية.

يكسر غراء المصفوفة خارج الخلية للأنسجة ، ويطلق الخلايا. يتحلل DNase من الحمض النووي الملوث

أضف المخزن المؤقت الذي يحتوي على BSA ، مما يؤدي إلى تعطيل الإنزيمات.

مرر التعليق عبر مصفاة لإزالة الحطام الكبير.

الطرد المركزي المرشح. تخلص من المادة الطافية الغنية بالإنزيم.

أعد تعليق الخلايا في المخزن المؤقت ، وانقلها إلى أنبوب جديد.

أضف وسائط تدرج الكثافة ، واخلط الخليط وقم بتراكبه مع المخزن المؤقت.

أثناء الطرد المركزي ، تشكل الخلايا والحطام طبقات منفصلة بناء على كثافتها.

قم بإزالة الطبقة العازلة العلوية وطبقة الحطام الوسطى.

أضف المخزن المؤقت إلى الطبقة السفلية التي تحتوي على الخلايا واخلطها. جهاز الطرد المركزي والتخلص من المادة الطافية التي تحتوي على وسائط تدرج الكثافة.

أعد تعليق خلايا الحصين في المخزن المؤقت لمزيد من التحليل.

باستخدام الملقط ، انقل قطع أنسجة الحصين إلى أنبوب C ، وأضف 30 ميكرولترا من مزيج الإنزيم 2 في الأنبوب. بعد لف الغطاء وتشديده حتى ينقر ، ضع الأنبوب في جهاز الفصل ، وقم بتشغيل البرنامج المناسب. أثناء تشغيل البرنامج ، قم بترطيب مصفاة خلية 70 ميكرون مسبقا موضوعة على أنبوب مخروطي 50 مليلتر مع 2 مل من المخزن المؤقت BSA.

بعد اكتمال برنامج التفكك ، أضف 4 ملليلتر من المخزن المؤقت BSA إلى الأنسجة المنفصلة ، وقم بتصفية الخليط من خلال مصفاة الخلية على الأنبوب المخروطي سعة 50 ملليلترا. بعد ذلك ، أضف 10 مل من DPBS إلى الأنبوب C. ثم أغلق الأنبوب ، وقم بتدوير المحلول برفق ، وقم بتصفيته من خلال مصفاة الخلية على الأنبوب المخروطي سعة 50 مل. الطرد المركزي تعليق الخلية المفلترة. تخلص من المادة الطافية دون إزعاج الحبيبات ، وقم بتخزين الحبيبات.

لإزالة الحطام ، أعد تعليق الحبيبات ب 1,550 ميكرولتر من DPBS البارد وانقل التعليق إلى أنبوب مخروطي الشكل سعة 15 ملليلترا. ثم أضف 450 ميكرولترا من محلول إزالة الحطام البارد ، وقم برفع الماصة لأعلى ولأسفل. قم بتراكب تعليق الخلية برفق مع 1 مليلتر من DPBS البارد ، مع الحفاظ على الطرف على جدار الأنبوب المخروطي. كرر الإجراء حتى يصبح إجمالي التراكب 2 ملليلتر.

بعد ذلك ، قم بالطرد المركزي للتعليق عند 3,000 مرة جم لمدة 10 دقائق مع تسارع كامل وفرامل كاملة. استنشق الطبقة العليا. بعد ذلك، امسح طرف الماصة ذهابا وإيابا لشفط الطبقة الوسطى البيضاء. قم بإزالة أكبر قدر ممكن من الطبقة الوسطى دون إزعاج الطبقة السفلية. بعد ذلك ، أضف 2 مل من DPBS البارد ، وقم بالماصة لأعلى ولأسفل للخلط. بعد ذلك ، قم بالطرد المركزي للتعليق عند 1,000 مرة جم لمدة 10 دقائق مع تسارع كامل وفرامل كاملة. بعد الطرد المركزي ، تخلص من المادة الطافية ، وأعد تعليق الحبيبات في 1 مليلتر BSA عازلة.

07:49

الحبل الشوكي العصبونات العزلة والثقافة من الفئران حديثي الولادة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

06:56

انفصال الخلايا عن ظهارة اللسان وميسينشيم/ النسيج الضام للفئران الجنينية في اليوم 12.5 و8 أسابيع

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

04:26

ثقافة أولية منخفضة الكثافة سهلة وقابلة للتكرار باستخدام مخزون مجمد من الخلايا العصبية الجنينية الحصين

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

11:17

جيل وحيدة الخلية معلقات من الأنسجة العصبية ماوس

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

10:27

العزلة والثقافة من الخلايا العصبية قرن آمون من الفئران قبل الولادة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:35

فصل واستزراع الخلايا العصبية من عينات أنسجة الحصين

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:51

تحضير معلق أحادي الخلية للخلايا المناعية من أنسجة دماغ الفئران

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

05:00

الحصول على مجموعات مختلفة من الخلايا العصبية من الحصين الفئران

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

03:55

الحصول على معلق أحادي الخلية من أنسجة دماغ الفئران المجمدة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

09:49

عزل ميكروليا الخاصة بالمنطقة من واحد الكبار الفار الدماغ نصف الكره لعمق خليه واحده التسلسل RNA

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 22 أغسطس 2026