JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأعصاب
0 مشاهدات • 2:12 د • July 8th, 2025
استجابة للمنبهات الخارجية ، تخرج الخلايا الجذعية العصبية للدماغ ذبابة الفاكهة ، أو NSCs ، من السكون ، وحالة توقف دورة الخلية ، وتعيد تنشيطها لبدء الانتشار.
خذ يرقات ذبابة الفاكهة حديثة الفقس ، وهي مرحلة تخرج فيها الخلايا العصبية بشكل طبيعي من السكون في الجسم الحي.
أمسك خطافات الفم والجسم لتقسيم اليرقة.
حدد موقع الدماغ خلف خطافات الفم واستئصاله.
انقل الأدمغة إلى آبار لوحة الثقافة التي تحتوي على وسائط.
في الآبار المعالجة ، تحتوي الوسائط على هرمون اختبار ، بينما تفتقر آبار التحكم إلى الهرمون. حضن.
في ظل ظروف الرقابة ، تظل NSCs هادئة بسبب عدم وجود محفزات خارجية.
في الآبار المعالجة ، يرتبط الهرمون بمستقبلات NSC محددة ، مما ينشط مسارات الإشارات النهائية ويعيد تنشيط NSCs.
تدخل الخلايا العصبية العصبية المعاد تنشيطها إلى دورة الخلية وتخضع للتكاثر.
بعد الحضانة ، أصبحت الأدمغة الآن جاهزة لتحليل المصب لتصور انتشار NSC ، مما يؤكد إمكانية إعادة تنشيط الهرمون.
قم بتشريح الأدمغة من اليرقات الموضوعة في طبق الساعة الزجاجي الثاني باستخدام SSM ، باستخدام ملقط تحت مجهر تشريح واضبط التكبير حسب الحاجة. استخدم ملقطا واحدا للاستيلاء على خطافات الفم ، والآخر ، أمسك الجسم برفق في منتصف الطريق لأسفل ، واسحب في الاتجاه المعاكس لتقسيم اليرقة إلى قطعتين. بعد تشريح 15 إلى 20 دماغا ، أضف 1 مليلتر من SSM في بئر واحد من صينية ثقافة معقمة مكونة من 24 بئرا. باستخدام ماصة دقيقة وطرف معقم ، انقل الأدمغة التي تم تشريحها حديثا إلى SSM ، متبوعا بحضانة الوسائط بالأدمغة لمدة 24 ساعة عند 25 درجة مئوية.