موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:06 دقيقة • July 8th, 2025
خذ تعليق الخلايا العصبية ، بما في ذلك الخلايا قليلة التغصن غير الناضجة والخلايا العصبية الأولية ، من جرو فأر.
أعد تعليق الخلايا في مخزن مؤقت لفرز الخلايا المغناطيسية لتجنب تكتل الخلايا.
أضف الميكروبيدات المغناطيسية المصممة هندسيا التي تحمل أجساما مضادة ل O4 على سطحها. حرك المحلول لضمان خلط موحد.
احتضان لتمكين الميكروبيدات من الارتباط بالجالاكتوليبيد الكبريتي ، وهو مستضد O4 على الخلايا قليلة التغصن ، بينما تظل الخلايا الأخرى غير مرتبطة أو مرتبطة بشكل فضفاض.
اغسل المزيج بمخزن إضافي لفرز الخلايا.
جهاز الطرد المركزي والتخلص من المادة الطافية ، ثم قم بتعليق الخلايا.
بعد ذلك ، قم بتمرير الخلايا المرتبطة بالخرزة إلى عمود فصل مغناطيسي مزود بمرشح يزيل كتل الخلايا الأكبر.
أثناء الجري ، تحت مجال مغناطيسي ، تتحرك المجمعات المرتبطة بالخرز نحو المغناطيس ، وترتبط على الجانبين.
يغسل لإزالة الخلايا غير المربوطة وغير المربوطة.
استرجع العمود من الفاصل واغسله بوسيط تكاثر لجمع الخلايا الدبقية قليلة التغصن الأولية للتطبيقات المستقبلية.
بعد العد ، قم بالطرد المركزي للخلايا مرة أخرى ، وأعد تعليق الحبيبات في 90 ميكرولترا من المخزن المؤقت لفرز الخلايا المغناطيسية الطازجة لكل 1 × 107 خلايا. بعد ذلك ، أضف 10 ميكرولترات من الخرز المضاد ل O4 لكل 1 × 107 خلايا ، واخلط محلول الخلية بنقرة لطيفة. بعد 15 دقيقة عند 4
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية