تحضير ركيزة منقوشة لدراسة الأنماط الظاهرية لخلية شوان

خذ رقاقة من السيليكون مع أنماط دقيقة من الهندسة المرغوبة لنمو الخلايا في شكل محدد.

صب خليط البوليمر عليه واتركه يتصلب.

قطع ختم مربع من البوليمر.

قم بتغطية سطح الختم المزخرف بطبقة بروتينية ، مما يسهل ارتباط الخلية.

باستخدام تيار هواء ، قم بإزالة البروتينات غير المحدودة.

خذ غطاء مطلي بالبوليمر.

ضع الجانب المزخرف من الختم عليه.

اضغط على الختم لنقل النمط. قم بإزالة الطابع.

انقل الغطاء إلى بئر يحتوي على مادة خافضة للتوتر السطحي لتغطية الأسطح العارية. هذا يزيد من الكراهية للماء على السطح ، مما يمنع التصاق الخلايا غير المرغوب فيها.

قم بإزالة الفاعل بالسطح واغسله بمحلول الفوسفات.

أضف خلايا Schwann واسمح لها بالالتصاق بالنمط الدقيق.

يغسل بمخزن مؤقت لإزالة الخلايا غير المتصلة.

أضف وسط الثقافة واحتضنها.

عندما تنمو الخلايا على طول السطح ، فإنها تأخذ شكل النمط المصغر ، مما يتيح دراسة النمط الظاهري لخلية شوان.

لتحضير ركيزة منقوشة ، ضع رقاقة سيليكون منقوشة داخل طبق بتري دائري بقطر 150 ملم وارتفاع 15 ملم واسكب PDMS منزوع الغاز على الرقاقة. قم بترسيخ PDMS في فرن على حرارة 60 درجة مئوية طوال الليل. اترك PDMS يبرد إلى درجة حرارة الغرفة ، ثم استخدم مشرطا جراحيا لقطع طوابع مربعات 30 × 30 ملم تحتوي على الأنماط الصحيحة ، مع الحرص على عدم إتلاف رقاقة السيليكون. عقم طوابع PDMS والأغطية القابلة للضبط عن طري