عزل خلايا شوان عن جذور العمود الفقري للفأر

خذ جذرا عصبيا وقطعه إلى قطع صغيرة.

انقله إلى أنبوب يحتوي على إنزيم هضمي واحتضانه.

يهضم الإنزيم المصفوفة خارج الخلية.

أضف وسائط تحتوي على مصل لوقف الهضم.

قم بضرب المحتوى بشكل متكرر ، ثم قم بالطرد المركزي وتخلص من المادة الطافية.

أعد تعليق الحبيبات.

مرر المعلق عبر مصفاة لإزالة الأنسجة غير المهضومة. احتضان الخلايا التي تم جمعها في طبق.

تلتصق الخلايا الليفية وخلايا شوان أو SCs بالصفيحة وتنقسم.

قم بإزالة الخلايا غير المرفقة. اغسل الخلايا المرفقة بمخزن مؤقت للفوسفات.

أضف الإنزيمات الهاضمة لتفكيك الجلدسات الجلدية الحساسة للهضم. أوقف الهضم باستخدام الوسائط.

افصل SCs تماما عن طريق إضافة الوسائط.

نقل الخلايا إلى أنبوب وجهاز طرد مركزي. تخلص من المادة الطافية وأعد تعليق الخلايا في الوسائط الخاصة ب SC.

انقل الخلايا إلى صفيحة غير مطلية واحتضنها.

سوف تلتصق أي الخلايا الليفية المتبقية ، مما يترك SCs معلقة.

انقل التعليق إلى لوحة مطلية بالمصفوفة.

احتضان لتعلق خلية شوان وانقسامها.

قم بتقطيع الأعصاب إلى قطع من 3 إلى 5 ملم بالمقص. أضف 1 مليلتر من 0.25٪ تربسين ، وانقل القطع العصبية إلى أنابيب طرد مركزي سعة 5 ملليلتر. احتضن عند 37 درجة مئوية لمدة 18 إلى 20 دقيقة. بعد ذلك ، لوقف الهضم ، أضف 3 إلى 4 ملليلتر من DMEM الذي يحتوي على 10٪ مصل بقري للجنين. قم بعرض الخليط لأعلى ولأسفل برفق ، حوالي 10 مرات. جهاز ط