تفريق الخلايا الجذعية الجنينية للفأر إلى مجموعة من الخلايا العصبية المتصلة بالشبكة

الخلايا الجذعية الجنينية لفأر البذور في طبق منخفض التعلق يحتوي على وسائط التمايز.

احتضان تحت الدوران لتسهيل التجميع الخلوي والتمايز إلى سلالة عصبية.

انقل الركام إلى أنبوب واتركه يستقر عن طريق الجاذبية. تجاهل الوسائط.

قم بتعليق الركام ونقله إلى الطبق الأصلي الذي يحتوي على وسائط التمايز المكملة بحمض الريتينويك.

يحفز حمض الريتينويك التعبير الجيني العصبي ، مما يؤدي إلى التمايز إلى خلايا سلف عصبية.

انقل الركام إلى أنبوب. قم بإزالة الوسائط وإضافة التربسين لفصل التجميعات.

أضف مثبطا لتحييد التربسين.

الماصة بشكل متكرر للحصول على تعليق خلوي متجانس. قم بتصفية التعليق لإزالة الركام.

جهاز الطرد المركزي وإزالة المادة الطافية. أعد تعليق الخلايا في الوسائط.

قم بزرع الخلايا في طبق مغطى بالبوليمر لتسهيل التصاق الخلايا.

قم بإزالة الوسائط. أضف وسائط جديدة تحتوي على عوامل النمو لتعزيز نضوج الخلايا العصبية وتشكيل مجموعة من الخلايا العصبية الشبكية.

يبدأ تمايز الخلايا الجذعية الجذعية إلى خلايا عصبية أثناء مرور الخلية الروتيني. قم بفصل ESCs كما كان من قبل ، ولكن قم بتضمين لوحة إضافية للتمايز العصبي. انقل 350 ميكرولترا من تعليق الخلية إلى طبق منخفض التثبيت بطول 10 سم يحتوي على 25 مل من وسط التمايز.

ضع الطبق على شاكر مداري مضبوطة على 30 إلى 45 دورة في الدقيقة داخل حاضنة زراعة الأنسجة عند 37 درجة مئوية و 5٪ ث