موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:19 دقيقة • July 8th, 2025
خذ معلقا للخلايا والحطام من الألياف العصبية الوركي للفأر المهضومة إنزيميا.
تمر عبر مصفاة ، وإزالة الحطام.
الطرد المركزي المرشح وإزالة المادة الطافية.
أعد تعليق الخلايا في وسائط تحتوي على مصل وزرعها في صفيحة ثقافة مغلفة بالبروتين الالتصاق.
احتضان التصاق الخلايا. استبدل الوسائط بوسائط Schwann الخلوية. احتضان لتكوين خلية شوان أحادية الطبقة.
قم بإزالة الوسائط وغسلها بمخزن مؤقت. احتضان مع التربسين لفصل الخلايا.
أضف وسائط تحتوي على مصل لإيقاف النشاط الأنزيمي.
اجمع الخلايا وأجهزة الطرد المركزي. تخلص من المادة الطافية.
أعد تعليق الخلايا في العازلة وأضف الميكروبيدات المغناطيسية المطلية بالأجسام المضادة.
احتضان لربط الأجسام المضادة بالبروتينات السكرية للأرومات الليفية.
جهاز الطرد المركزي والتخلص من المادة الطافية. أعد تعليق الخلايا في المخزن المؤقت ، وقم بتحميلها في عمود فصل مغناطيسي يحتوي على كرات مغناطيسية موضوعة في المجال المغناطيسي للفاصل المغناطيسي.
يحتفظ المجال المغناطيسي بالخلايا الليفية المرتبطة بالميكروبيدات ، مما يسمح بجمع خلايا شوان في التدفق.
انقل الأعصاب المهضومة إلى أنبوب سعة 50 مليلتر إلى جهاز طرد مركزي عند 188 جم لمدة 10 دقائق عند 4 درجات مئوية. بعد التخلص من المادة الطافية ، أعد تعليق الحبيبات في 10 ملليلتر من DMEM تحتوي على 10٪ FCS و 50 ميكروغرام لكل مليلتر من الجنتاميسين.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية