موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 4:43 دقيقة • July 8th, 2025
خذ التلفيف المسنن من دماغ الفأر في مخزن مؤقت للتجانس البارد.
ينفصل ميكانيكيا لإطلاق الخلايا العصبية والخلايا الدبقية والخلايا الجذعية.
يتخلل المنظف المعتدل للمخزن المؤقت الخلايا ، ويطلق النوى والعضيات الأخرى.
قم بتصفية المتجانس لإزالة بقايا الأنسجة. بعد ذلك ، جهاز الطرد المركزي ، وإزالة العضيات ، وإعادة التعليق في مخزن التجانس لتحلل أي خلايا سليمة.
جهاز الطرد المركزي مرة أخرى ، قم بإزالة المادة الطافية التي تحتوي على عضيات تم إطلاقها ، وأعد تعليق النوى في مخزن مؤقت للغسيل.
قم بالفلتر لإزالة أي حطام وأجهزة طرد مركزي وإزالة المادة الطافية.
أدخل صبغة الحمض النووي الفلورية لتسمية جميع النوى والجسم المضاد المترافق بالفلوروفور الذي يرتبط بالمستضد النووي العصبي ، أو NeuN ، مع تسمية نوى الخلايا العصبية.
باستخدام فرز النوى المنشطة بالفلورة ، حدد الركام ذات كثافة مضان صبغة الحمض النووي الأعلى وخصائص تشتت أعلى ، وفصل النوى المفردة.
تحليل النوى المفردة ، وفصل النوى العصبية الإيجابية NeuN وعزل النوى السالبة NeuN التي تنتمي إلى الخلايا الدبقية والخلايا الجذعية.
قم بتجانس الأنسجة ب 10 ضربات من المدقة A السائبة ، متبوعة ب 15 ضربة من المدقة B الضيقة. انقل الجانس إلى أنبوب 15 ملليلتر مبرد مسبقا. اشطف الخالط Dounce ب 1 مليلتر من HB البارد ، وامزجه مع نفس الأنبوب.
أضف 3 ملليلتر من HB إلى أنبوب سعة 15
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية