موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 5:00 دقيقة • July 8th, 2025
خذ شظايا الحصين الفئران.
احتضان مع غراء لهضم المصفوفة خارج الخلية للأنسجة وفك الخلايا ، بما في ذلك الخلايا العصبية والخلايا النجمية والخلايا الدبقية الصغيرة.
أضف DNase واخلط.
قم بفصل الأنسجة ميكانيكيا باستخدام ماصات بأقطار متناقصة تدريجيا للحصول على معلق أحادي الخلية. احتضان DNase لتحلل الحمض النووي الملوث.
مرر التعليق من خلال مصفاة ، وإزالة الحطام.
أضف المخزن المؤقت الذي يحتوي على أيونات ثنائية التكافؤ لإيقاف النشاط الأنزيمي.
جهاز طرد مركزي وإزالة المادة الطافية الغنية بالإنزيم.
الآن ، أضف حبات مغناطيسية عازلة ومضادة للمايلين. احتضان للحبات لربط حطام المايلين.
بعد الحضانة ، جهاز الطرد المركزي وإزالة المادة الطافية.
أعد تعليق الخليط في المخزن المؤقت وقم بتحميله على عمود فصل مغناطيسي يحتوي على كرات مغناطيسية حديدية موضوعة في المجال المغناطيسي للفارز المغناطيسي.
يحتفظ المجال المغناطيسي بحطام المايلين المرتبط بالخرزة المغناطيسية في العمود بينما تمر الخلايا الخالية من المايلين.
اغسل العمود بالمخزن المؤقت واجمع التدفق الذي يحتوي على الخلايا العصبية والخلايا النجمية والخلايا الدبقية الصغيرة.
ابدأ التفكك العصبي باستخدام شفرات حلاقة معقمة لتقطيع كل عينة يتم حصادها من أنسجة المخ البالغة إلى قطع صغيرة من 30 إلى 400 ملليغرام على غطاء صفيحة استزراع من ستة آبار. ثم اغمر الأنسجة في 1 ملليلتر من
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية