موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 5:29 دقيقة • July 8th, 2025
حصاد الحبال الشوكية للفأر وتقطيعها إلى شظايا.
انقل الشظايا إلى أنبوب يحتوي على إنزيم محلل للبروتين و DNase. دوامة وحضانة.
يهضم الإنزيم المصفوفة خارج الخلية للأنسجة ، بينما يتحلل DNase للحمض النووي الحر الملوث
دوامة مرة أخرى والماصة بشكل متكرر لإكمال تفكك الأنسجة ، والحصول على تعليق أحادي الخلية.
جهاز الطرد المركزي وإزالة المادة الطافية. أعد تعليق الخلايا في محلول يحتوي على DNase ومثبط للبروتياز والدوامة. يعمل المثبط على تحييد الإنزيم.
ضع طبقة من محلول المثبط الطازج في الأعلى ، وجهاز الطرد المركزي ، وقم بإزالة المادة الطافية.
أعد تعليق الخلايا في وسط تدرج الكثافة ، والدوامة ، ثم أجهزة الطرد المركزي.
تستقر الخلايا في الأسفل ، بينما يظل حطام المايلين في الأعلى.
تخلص من الحطام. اغسل بشكل متكرر باستخدام المخزن المؤقت وجهاز الطرد المركزي وقم بإزالة المادة الطافية. أعد تعليق الخلايا في وسط النمو.
لوحة الخلايا. يسهل السطح غير المطلي ارتباط الخلايا الدبقية.
قم بإزالة الوسائط المستهلكة وإضافة وسائط جديدة للحث على تكاثر الخلايا الدبقية ، وإنشاء ثقافة دبقية مختلطة.
من خلال العمل في غطاء مزرعة الأنسجة ، قم بنقل أربعة حبال شوكية للفأر إلى طبق بتري من HBSS. استخدم مقصا وملقطا معقما لتقطيع كل من الحبل الشوكي إلى قطع صغيرة. بعد ذلك ، انقل القطع إلى أنبوب مخروطي سعة 50 مليلتر يحتوي على خليط إنزيم غر
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية