توليد رقاقة حاجز الدم الدماغي باستخدام الخلايا السليفة المشتقة من iPSC
موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 7:53 دقيقة • July 8th, 2025
خذ شريحة مائع دقيقة مع قنوات متراكبة ومغلفة بمصفوفة مفصولة بغشاء مسامي.
خلايا السلف العصبية المشتقة من iPSC في القناة العلوية. احتضن الالتصاق الخلية ، ثم اغسله لإزالة الخلايا غير المتصلة.
التالى, البذور الخلايا البطانية الأوعية الدموية الدقيقة في الدماغ المشتقة من iPSC في القناة السفلية.
اقلب الرقاقة واحتضانها لربط الخلايا البطانية بجانب الغشاء من القناة السفلية.
بعد ذلك ، اقلب الشريحة لربط الخلايا بالجانب السفلي من القناة ، لتشكيل هيكل أحادي الطبقة يشبه الأنبوب. اغسل كلتا القناتين بوسائط خاصة بالخلية.
قم بتدفق وسيط التمايز العصبي باستمرار في القناة العلوية ووسط الخلية البطانية في القناة السفلية.
تستخدم الخلايا البطانية عوامل النمو من الوسط إلى الناضج وتشكل تقاطعات ضيقة تشبه الأوعية الدموية ، وتشكل جانب الدم.
تؤدي العوامل العصبية إلى تمايز الخلايا السلفية العصبية إلى خلايا دماغية مختلفة ، وتشكيل جانب الدماغ. تتفاعل هذه الخلايا مع الخلايا البطانية ، مما يخلق حاجزا دماغويا على الشريحة.
للبدء ، أحضر الطبق الذي يحتوي على الرقائق المحضرة إلى خزانة السلامة الحيوية. باستخدام ماصة P200، اغسل كلتا القناتين برفق عن طريق إضافة 200 ميكرولتر من وسط التمايز العصبي إلى المدخل وسحب السائل من المخرج. تجنب ملامسة المنافذ ، قم بشفط قطرات الوسائط الزائدة بعناية من سطح الشريحة.
حرك تعليق الخلية برفق لض
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية