تقييم النشاط الجذاب أو المثير للاشمئزاز للبروتينات باستخدام الخلايا العصبية في الحصين

0 مشاهدات3:45 د • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ابدأ بطبق يحتوي على مصفوفة سيليكون تحتوي على قنوات صغيرة متعددة متصلة بمنافذ المدخل والمخرج.

حقن بروتين الاختبار بنشاط مثير للاشمئزاز من خلال المدخل لملء القنوات.

احتضن للسماح بالالتصاق بالبروتين في منطقة القناة ، وتشكيل مناطق اختبار البروتين ، ثم اغسلها.

قم بإزالة المصفوفة ، وتراكب المنطقة المطلية ببروتين تحكم يمتلك نشاطا جذابا ، واحتضانه.

هذا يسهل التزام بروتين التحكم بالمناطق الفارغة بين مناطق بروتين الاختبار ، مما يؤدي إلى إنشاء مناطق بروتين تحكم بنمط مخطط متناوب ، ثم غسله.

أضيفي اللامينين لتغطية المنطقة المخططة ، ثم اغسلها.

قم بزرع المنطقة المغلفة بتعليق أحادي الخلية من الخلايا العصبية في الحصين واحتضنها.

في منطقة البروتين الاختباري ، تتفاعل الخلايا العصبية مع البروتينات ، مما يؤدي إلى إشارات تتسبب في صد الخلايا العصبية ، مما يثبط ارتباطها.

في المقابل ، تعزز تفاعلات الخلايا العصبية والبروتين في منطقة البروتين الضابط الارتباط العصبي ، مما يدعم نموها وامتداد المحور العصبي.

تحضير البروتينات المؤتلفة ذات العلامات الفلورية في PBS. اصنع 25 ميكرولترا لكل طبق شريطي. دع الخليط يحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة. بعد ذلك ، لكل طبق ، قم بتحميل حقنة قياس 22 مع 25 ميكرولترا من البروتين المخفف وحقنها من خلال الفتحة الصغيرة الموجودة على جانب المصفوفة.

تجنب حقن فقاعات الهواء في المصفوفات لأنها ستزعج ارتباط البروتينات بالمرض.

الآن ، احتضن الأطباق لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية في حاضنة زراعة الخلايا. بعد الحضانة ، قم بإيداع 300 ميكرولتر من PBS في الشق العلوي لكل مصفوفة. بعد ذلك ، قم بشفط PBS من ثقب صغير موجود على جانب كل مصفوفة لإزالة جميع البروتينات المؤتلفة غير المتصلة. لا تستنشق PBS بالكامل لأن البروتينات سوف تجف.

قم بإجراء شطف PBS هذا ما مجموعه ثلاث مرات. بعد ذلك ، قم بإزالة المصفوفة بعناية من كل طبق. بعد ذلك ، أضف على الفور حوالي 100 ميكرولتر من بروتين التحكم على المنطقة المخططة بأكملها ، مما يؤدي إلى إنشاء طلاء بديل على كل طبق.

بعد ذلك ، احتضن الأطباق لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية. في هذه الأثناء ، على الجليد ، قم بإذابة اللامينين في PBS بمعدل 20 ميكروغرام لكل ملليلتر. بعد 30 دقيقة ، اغسل الأطباق ثلاث مرات باستخدام PBS. ثم قم بتغطية كل طبق بحوالي 100 ميكرولتر من اللامينين البارد وأعد الأطباق إلى الحاضنة لمدة ساعة أخرى.

بعد ساعة ، استخدم PBS لغسل الأطباق ثلاث مرات مرة أخرى. بعد الغسيل الثالث ، أضف حوالي 150 ميكرولتر من وسط الثقافة إلى كل طبق. بعد ذلك ، احتضان الأطباق في حاضنة ثاني أكسيد الكربون بنسبة 5٪ عند 37 درجة مئوية حتى تكون هناك حاجة إليها في المرة التالية. عد الخلايا باستخدام مقياس كثافة الدم وقم بتشغيل 10,000 خلية عصبية في 150 ميكرولترا من وسائط الثقافة على كل لوحة شريطية معدة. قم بإيداع التعليق بعناية لتغطية منطقة الشريط بأكملها.

08:20

مراقبة البصرية من البروتين العصبية باستخدام حمض أميني مصطنعة مشفرة وراثيا في الخلايا العصبية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

07:30

قياس الالتقام حويصلة متشابك في الخلايا العصبية هيبوكامبال مثقف

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

06:53

استخدام الخلايا العصبية فرس النهر المستزرعة الأولية لدراسة تجميع الأجزاء الأولية أكسون

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

16:38

تسجيلات الكهربية المزدوجة للSynaptically-استجابات Astroglial والخلايا العصبية في الحصين شرائح الحاد

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

04:10

قياس نشاط البروتيازوم في مقصورات مختلفة تحت الخلايا في دماغ الفئران

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

16:33

الكشف عن بروتين Palmitoylation في الخلايا العصبية قرن آمون بواسطة مثقف مناعي والبورصات الأسيل، البيوتين (آبي)

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

10:03

عزل CA1 النووي المخصب الكسور من شرائح الحصين لدراسة تعتمد على نشاط استيراد النووية من رسول البروتينات Synapto النووية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

10:55

تقييم شجيري تشجر في التلفيف المسنن من منطقة الحصين في الفئران

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

07:43

التصور المناعى من الحصين العصبية آخر بعد المكانية التعلم في نموذج الفأر من الاضطرابات العصبية النمائية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:11

شريط الفحص لدراسة آخر جذاب أو مثيرة للاشمئزاز من الركيزة البروتين عن طريق فصل الخلايا العصبية الحصين

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 1 أغسطس 2026