موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:45 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بطبق يحتوي على مصفوفة سيليكون تحتوي على قنوات صغيرة متعددة متصلة بمنافذ المدخل والمخرج.
حقن بروتين الاختبار بنشاط مثير للاشمئزاز من خلال المدخل لملء القنوات.
احتضن للسماح بالالتصاق بالبروتين في منطقة القناة ، وتشكيل مناطق اختبار البروتين ، ثم اغسلها.
قم بإزالة المصفوفة ، وتراكب المنطقة المطلية ببروتين تحكم يمتلك نشاطا جذابا ، واحتضانه.
هذا يسهل التزام بروتين التحكم بالمناطق الفارغة بين مناطق بروتين الاختبار ، مما يؤدي إلى إنشاء مناطق بروتين تحكم بنمط مخطط متناوب ، ثم غسله.
أضيفي اللامينين لتغطية المنطقة المخططة ، ثم اغسلها.
قم بزرع المنطقة المغلفة بتعليق أحادي الخلية من الخلايا العصبية في الحصين واحتضنها.
في منطقة البروتين الاختباري ، تتفاعل الخلايا العصبية مع البروتينات ، مما يؤدي إلى إشارات تتسبب في صد الخلايا العصبية ، مما يثبط ارتباطها.
في المقابل ، تعزز تفاعلات الخلايا العصبية والبروتين في منطقة البروتين الضابط الارتباط العصبي ، مما يدعم نموها وامتداد المحور العصبي.
تحضير البروتينات المؤتلفة ذات العلامات الفلورية في PBS. اصنع 25 ميكرولترا لكل طبق شريطي. دع الخليط يحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة. بعد ذلك ، لكل طبق ، قم بتحميل حقنة قياس 22 مع 25 ميكرولترا من البروتين المخفف وحقنها من خلال الفتحة الصغيرة الموجودة على جانب المصفوفة.
تجنب حقن فقاعات الهواء في المصفوفا
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية