موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:59 دقيقة • July 8th, 2025
خذ أقساما ثابتة لدماغ الفأر تحتوي على خلايا عصبية ، بما في ذلك الخلايا الجذعية العصبية المتكاثرة المسماة ب EdU ، وهو نظير ثايميدين.
حدد الأقسام بعلامة كارهة للماء لمنع انتشار المحلول.
أضف منظفا لنفاذية الأنسجة. يغسل لإزالة المنظفات الزائدة.
أضف فلوروفور لتسمية EdU. قم بإزالة الفلوروفورات الزائدة.
باستخدام المجهر الفلوري ، تأكد من التلوين المناسب للخلايا المسماة EdU.
ضع حاجزا حازما يحتوي على بروتينات لمنع ارتباط الأجسام المضادة غير المحددة. قم بإزالة البروتينات الزائدة.
احتضان بالأجسام المضادة الأولية التي ترتبط ببروتينات معينة في الخلايا الجذعية العصبية. قم بإزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة.
أضف الأجسام المضادة الثانوية المترافقة بالفلوروفور لربط الأجسام المضادة الأولية. اغسل الأجسام المضادة غير المرتبطة.
تلطخ النوى بصبغة وإزالة الصبغة الزائدة.
قم بإزالة العلامات الكارهة للماء ، وقم بتطبيق وسائط التثبيت ، وضع غطاء للمساء.
باستخدام المجهر متحد البؤر ، راقب الأقسام لتصور الخلايا الجذعية العصبية المصنفة.
لتلطيخ أقسام الأنسجة بنظير الثايميدين ، قم بإزالة أقسام الأنسجة من عازلة السترات. دع أقسام الأنسجة تجف وتلتصق تماما بالشرائح قبل رسم حدود بقلم مسعور. بعد ذلك ، قم باختراق الأقسام باستخدام المخزن المؤقت للنفاذية لمدة 20 إلى 30 دقيقة. اغسل الأقسام مرتين باستخدام TBS Triton لمدة 5 دقائ
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية