تحديد عدوى فيروس نقص المناعة البشرية النشطة في نموذج الفئران

ابدأ بفأر مخدر ، وقم بتطهير رأسه المحلوق ، وقم بتثبيته في جهاز تجسيم.

قم بعمل شق خط الوسط لكشف الجمجمة.

ضع علامة على وضعين على الجمجمة وحفر ثقوب صغيرة.

قم بإرفاق حقنة بها فيروسات خيميرية تحتوي على الحمض النووي الريبي لفيروس نقص المناعة البشرية الموجه البيئية داخل ناقل فيروسي عدسي بالجهاز التجسيمي.

أدخل الإبرة في الثقب ، مستهدفا خلايا قشرة الدماغ ، بما في ذلك الخلايا الدبقية الصغيرة ، الخلايا المناعية في الدماغ.

حقن الفيروسات ببطء لتوزيعها المتساوي في القشرة.

بعد الحقن ، قم بخياطة الشق ، وتطهير المنطقة ، والسماح للفأر بالتعافي.

يتفاعل الفيروس المحقون مع مستقبلات خلايا الدماغ ، وينصهر ، ويطلق الحمض النووي الريبي لفيروس نقص المناعة البشرية في السيتوبلازم.

يتم نسخ الحمض النووي الريبي عكسيا إلى الحمض النووي ويتكامل في الحمض النووي للخلية.

تعبر الخلية المصابة عن المكونات الفيروسية ، وتنتج الحمض النووي الريبي والبروتينات الجديدة.

تتجمع هذه الفيروسات وتطلق كفيروسات جديدة ، مما يزيد من الحمل الفيروسي في الدماغ ، مما يؤدي إلى الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية النشط.

لحقن EcoHIV EGFP ، بعد التأكد من عدم الاستجابة لمنعكس الدواسة ، حلق الشعر من منطقة الدماغ ، وتعقيم الجلد المكشوف مرتين باستخدام 70٪ من الإيثانول ، ومقشر قائم على الكلورهيكسيدين. قم بتأمين الجرذ في وضع الانبطاح في جهاز تجسيمي ، وقم بعمل شق من 5 إلى 6 سم عبر الجلد على طول خط الوسط لفروة الرأس.

ضع علامة على موضع حفر واحد عند 0.8 ملم جانبي وواحد 1.2 ملم منقار إلى بريجما ، وحفر ثقب قطره 0.4 ملم في كل موضع جمجمة. قم بتحميل 1.04 مرة في 10 إلى وحدات النقل السادسة لكل مليلتر من محلول فيروس العوسف EcoHIV المعيار في حقنة حقن سعة 10 ميكرولتر ، وقم بتأمين المحقنة في الجهاز التجسيمي.

حرك الإبرة بالقرب من سطح فتحة حفر واحدة وأدخل الإبرة 2.5 ملم في الحفرة. قم بنقع 1 ميكرولتر من محلول الفيروسات بمعدل 0.2 ميكرولتر من الفيروس في الدقيقة. عندما يتم حقن كل الفيروس ، اترك الإبرة داخل منطقة الحقن لمدة خمس دقائق قبل سحب الإبرة ببطء حتى تصبح خارج جمجمة الفئران.

أغلق شق الجلد بخيط 4-0 من الحرير ، وقم بتعقيم المحلول بنسبة 70٪ من الإيثانول. ثم ضع الجرذ في غرفة الاسترداد مع وسادة تسخين مع المراقبة حتى الراعالية.