التقييم في المختبر ل β الأميلويد المجمعة على انهيار مخروط نمو الخلايا العصبية

ابدأ بشريحة ثقافة متعددة الآبار تحتوي على خلايا عصبية من جنين فأر في وسط.

تظهر الخلايا العصبية مخاريط النمو عند أطراف محاورها المتنامية. تشتمل هذه الهياكل على نتوءات رفيعة تسمى filopodia وامتدادات تشبه الألواح تسمى lamellopodia ، والتي تتكون من خيوط الأكتين والأنابيب الدقيقة ، وهي مكونات الهيكل الخلوي.

عالج آبار الاختبار ببروتين β الأميلويد المجمع، أو Aβ، وآبار التحكم بمحلول السيارة.

في آبار الاختبار ، يرتبط Aβ المجمعة بمستقبلات الغشاء ، مما يؤدي إلى بدء إشارات المصب التي تعمل على فسفرة البروتينات المنظمة للهيكل الخلوي.

تعطل البروتينات الفسفرة خيوط الأكتين والأنابيب الدقيقة ، مما يزعزع استقرار السلامة الهيكلية لمخروط النمو ويسبب انهياره.

احتضان بمثبت للحفاظ على البنية الخلوية ، ثم اغسل الخلايا وقم بتركيبها للتصوير.

باستخدام المجهر ، قارن الهياكل الخلوية في آبار الاختبار والتحكم.

يشير الحدوث المتزايد لانهيار مخروط النمو في الخلايا العصبية المعالجة ب Aβ إلى التأثير السام لمجاميع Aβ.

ابدأ هذا الاختبار قبل أسبوع على الأقل عن طريق فتح قارورة جديدة من A-beta-42 كامل الطول الذي تم الحصول عليه تجاريا وإذابة المحتويات في الماء المقطر المعقم بتركيز 0.5 ملليمول. احتضان عند 37 درجة مئوية لمدة سبعة أيام للحث على التراكم والسمية. قم بإعداد حصص من A-beta-42 المجمعة ، وتخزينها على حرارة 80 درجة مئ