موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 4:59 دقيقة • July 8th, 2025
خذ شريحة زجاجية تحتوي على شريحة قشرية من أنسجة المخ تم جمعها من مريض الزهايمر. يحتوي النسيج على رواسب أميلويد بيتا غير القابلة للذوبان داخل الحمة والشعيرات الدموية الدماغية.
اغمر الشريحة في الكحول المخفف لإزالة الدهون والأملاح.
اغسل بالكحول المطلق لتجفيف الأنسجة ، ثم ضع مثبتا للحفاظ على بنية الأنسجة.
جفف الشريحة بالمكنسة الكهربائية ، وإزالة أي رطوبة.
عالج ببخار حمض الفورميك في بيئة رطبة لتكسير مجاميع الأميلويد بيتا إلى ببتيدات قابلة للذوبان أصغر.
باستخدام ماسح ضوئي ، قم بإنشاء صور للسمات الهيكلية للأنسجة لتفسير البيانات من قياس الطيف الكتلي للتصوير.
رش محلول مصفوفة على العينة.
باستخدام مطياف الكتلة ، قم بتطبيق ليزر تمتصه المصفوفة لتأين الببتيدات. ثم يحددها الكاشف بناء على نسبة الكتلة إلى الشحن.
تحليل البيانات لإنتاج الصور ، والكشف عن توزيع ببتيدات الأميلويد بيتا في حمة الأنسجة والشعيرات الدموية الدماغية.
لشطف أقسام الأنسجة ، اغمر العينات في 40 إلى 100 مل من الإيثانول بنسبة 70٪ في وعاء تلطيخ زجاجي لمدة 30 ثانية لإزالة الدهون الذاتية والأملاح غير العضوية. اغسل العينات باستخدام تسلسل الغسيل المدرج في بروتوكول النص. ثم جفف العينات في فراغ لمدة 30 دقيقة.
الآن ، عالج أقسام الأنسجة ببخار حمض الفورميك للحصول على تأين أفضل لبروتينات الأميلويد بيتا من أنسجة الدماغ لتشريح الجثة. للقيام بذلك ،
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية