موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 3:25 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بثقافة الخلايا العصبية الملتصقة المعالجة بمجاميع ألفا سينوكلين أو ألفا إس ، وهي كتل من بروتين غير مطوي.
تتجمع هذه الكتل لتشكل شوائب داخل الخلايا.
استبدل الوسائط بمحلول تثبيت للحفاظ على سلامة الخلوية.
قم بإزالة محلول التثبيت واغسله بمخزن مؤقت.
بعد ذلك ، أضف خافض للتوتر السطحي لاختراق الغشاء الخلوي.
قم بإزالة الفاعل بالسطح واغسله بمحلول عازل.
أدخل محلول مانع لمنع ارتباط الأجسام المضادة غير المحددة.
الآن ، احتضن بالأجسام المضادة الأولية التي ترتبط على وجه التحديد بشوائب alpha-S والبروتينات الهيكلية.
يغسل بمحلول عازل لإزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة.
احتضان بالأجسام المضادة الثانوية المسماة بالفلورسنت.
إزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة.
أضف بقعة فلورية لتسمية النواة.
قم بإزالة البقعة واغسلها بالعازلة.
باستخدام وسائط التثبيت ، قم بتركيب الغطاء مع الخلايا العصبية على شريحة.
تحت المجهر الفلوري ، لاحظ شوائب alpha-S ذات العلامات المناعية داخل الخلايا العصبية.
لإجراء التألق المناعي في غطاء الدخان الكيميائي ، قم بإصلاح الخلايا العصبية بنسبة 2٪ بارافورمالدهيد في PBS ومحلول سكروز 5٪ لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة دون اهتزاز. بعد 15 دقيقة ، قم بإزالة محلول التثبيت ، واغسل الخلايا العصبية لفترة وجيزة باستخدام PBS ثلاث مرات.
بعد ذلك ، قم باختراق الخلايا العصبية بنسبة 0.3٪ من الفاعل با
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية