JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأعصاب
0 مشاهدات • 2:26 د • July 8th, 2025
ابدأ بمحلول resiniferatoxin (RTX) ، وهو ناهض عالي التقارب لمستقبل TRPV1 - القنوات الأيونية الحساسة للألم التي يتم التعبير عنها في الخلايا العصبية الحسية.
خذ فأرة بالغة مخدرة وقم بإدارة RTX داخل الصفاق.
يدخل الدواء في الدورة الدموية الجهازية ويصل إلى العقد الجذرية الظهرية (DRG) ، وهي مجموعة من أجسام الخلايا العصبية الحسية الموجودة بالقرب من الحبل الشوكي.
يعبر RTX حاجز الدم العصبي ويتفاعل مع الخلايا العصبية الحسية ذات القطر الصغير في DRG التي تعبر بكثرة عن TRPV1.
يرتبط RTX ب TRPV1 ينشط المستقبلات ، مما يؤدي إلى تدفق أيون الكالسيوم الهائل إلى الخلايا العصبية.
ينشط الكالسيوم داخل الخلايا الإنزيمات التي تحلل الدهون الفوسفورية في غشاء الخلية والبروتينات الخلوية والحمض النووي ، مما يؤدي في النهاية إلى موت الخلايا العصبية.
بعد ذلك ، تبدأ الألياف العصبية داخل البشرة (IENFs) ، وهي المحطات الطرفية للخلايا العصبية الحسية ذات القطر الصغير التي تغذي الجلد ، في التدهور.
يؤدي هذا التنكس في IENFs إلى فقدان المدخلات الحسية من الجلد ، وبالتالي إنشاء نموذج اعتلال عصبي صغير للألياف.
للبدء ، ارتد معدات الحماية الشخصية واتخذ الاحتياطات المناسبة أثناء صنع محلول مخزون Resiniferatoxin أو RTX. قم بتخفيف كمية واحدة من 600 ميكرولتر في محلول ملحي للتجربة ، وقسم الباقي إلى 12 ميكرولتر للتخزين. بالنسبة لفئران الاختبار ، استخدم الفئران البالغة ICR البالغة البالغة من العمر ثمانية أسابيع ، والتي يتراوح وزنها بين 35 و 40 جراما. قم بإعطاء جرعة واحدة من محلول RTX داخل الصفاق باستخدام حقنة حقن مجهرية. بعد ذلك ، قم بحقن مجموعة ثانية من الفئران بحجم متساو من السيارة لتكون بمثابة عنصر تحكم. بعد إجراء جميع الحقن ، ضع الفئران في أقفاص منزلها ، وتأكد من أن لديهم إمكانية الوصول إلى الطعام والماء.