نمذجة تنكس الشبكية وتجديدها في أسماك الزرد باستخدام إصابة الليزر البؤري

ابدأ بسمك الزرد البالغ المخدر.

انقل السمكة إلى حامل دبوس سيليكون وقم بتطبيق طبقة من البوليمر الاصطناعي لتليين العين.

بعد ذلك ، ضع عدسة ليزر أمام العين لتركيز شعاع توجيه الليزر على شبكية العين.

قم بتوجيه الليزر إلى عين الزرد ، مما يؤدي إلى إصابة شبكية العين.

يتسبب الليزر في حدوث تلف حراري وموت الخلايا المستقبلة للضوء في الشبكية ، مما يؤدي إلى عملية تنكسية تتقدم على مدار أيام وتمتد من ظهارة الشبكية المصطبغة إلى الطبقة الخارجية الضفيرية.

ردا على ذلك ، تخضع خلايا مولر الدبقية (MG) للدبقي التفاعلي ، وتصبح تضخمية وتكاثرية.

ثم تتساقط هذه الخلايا إلى أسلاف الخلايا الجذعية.

تهاجر الخلايا السلفية تدريجيا إلى موقع الإصابة ، وتسترشد بالإشارات المكانية والزمانية من البيئة المكروية ، وتتمايز إلى أنواع خلايا شبكية ناضجة على مدى عدة أيام ، مما يسهل تجديد بنية الشبكية.

قم بإعداد محلول مخزون من التخدير عن طريق إذابة 400 ملليغرام من مسحوق التريكيين في 97.9 مل من ماء الخزان و 2.1 مل من TBS مولي واحد. اضبط على درجة الحموضة 7.0 مع تريس مولي واحد عند الرقم الهيدروجيني 9. لعمل محلول العمل ، قم بتخفيف محلول مخزون التريكيين من 1 إلى 25 في ماء الخزان ، وانقل 50 مل إلى طبق بتري. ثم ضع الزرد في محلول التخدير لمدة 2 إلى 5 دقائق ، حتى تصبح غير متحركة ولا تستجيب للمنبهات الخارجية.

انقل كل سمكة يدويا إلى حامل دبوس سيليكون مصنوع خصيصا للمعالجة بالليزر.

التخدير المناسب أمر بالغ الأهمية لرفاهية ونجاح الإجراء. لذلك ، يعد محلول التريكيين المحضر حديثا أمرا محوريا ، ويجب ألا يتجاوز وقت الخروج من الماء 10 دقائق.

قم بإعداد طاقة خرج ليزر الصمام الثنائي 532 نانومتر إلى 70 مللي واط ، ومدة النبضة إلى 100 مللي ثانية ، والقطر الجوي إلى 50 ميكرون. ثم ضعي 1 إلى 2 قطرات من 2٪ هيدروكسي بروبيل ميثيل سلولوز على العين.

عند وضع ميثيل سيل على العين ، تأكد من أن المحلول اللزج لا يذهب إلى الخياشيم.

بعد ذلك ، استخدم عدسة ليزر قاع العين 2 ملم لتركيز شعاع تصويب الليزر على شبكية العين. ضع أربع بقع ليزر حول العصب البصري في العين اليسرى ، واستخدم العين اليمنى غير المعالجة كتحكم داخلي.