موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 2:21 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بحقنتين مملوءتين بكميات مختلفة من الوسائط التي تحتوي على الفيروسات المستهدفة لعدوى الجهاز العصبي المركزي (CNS).
احتفظ بجرو الفأر في وضع الانبطاح. تطهير الرأس وحقن الحجم الأصغر من محلول الفيروس داخل المخ عبر منطقة لامدا.
هذا يسمح للفيروسات بتجاوز الحاجز الدموي الدماغي والوصول مباشرة إلى أنسجة المخ.
بعد ذلك ، امسك جرو الفأر في وضع ضعيف. تطهير وحقن الحجم الأكبر من محلول الفيروس في البطن.
هذا يسهل الانتشار الجهازي للفيروس عبر الأوعية الدموية ، ويصيب أجزاء أخرى من الجهاز العصبي المركزي.
تدخلالفيروسات المحقونة الخلايا العصبية وتستخدم الآلات المضيفة للتكاثر ، مما يؤدي إلى موت الخلايا.
تؤديالفيروسات أيضا إلى تحفيز الجهاز المناعي ، مما يسبب التهاب الجهاز العصبي المركزي وإنشاء نموذج عدوى الجهاز العصبي المركزي.
قبل البدء في إجراء العدوى ، قم بتخفيف مخزون فيروس حمى الضنك غير المتكيف 2 إلى 1 في 1 في 10 إلى وحدات تشكيل البلاك الخامسة لكل 40 ميكرولتر من تركيز متوسط RPMI 1640. بعد ذلك ، قم بتحميل حقنة سعة 10.3 مليلتر مزودة بإبرة قياس 30 مع 10 ميكرولتر من الفيروس المخفف وحقنة 10.3 مل مزودة بإبرة قياس 30 مع 30 ميكرولتر من الفيروس لكل.
لتوصيل الفيروس داخل المخ ، اضغط على أوراكل بين الإبهام والسبابة لكبح جماح فأر الرضيع البالغ من العمر سبعة أيام في وضع الانبطاح ، وحقن حجم 10 ميكرولتر من الفيروس المخفف في منطقة لامدا عند تقاطع الخيط السهمي واللامدويد. بعد الحقن داخل المخ ، استخدم الإبهام والسبابة لتثبيت الفأر في وضع ضعيف وبرفق داخل الصفاق ، وحقن حجم 30 ميكرولتر من الفيروس المخفف في بطن الفئر.